文献综述
三相分离是一种新型蛋白质分离纯化技术, 具有盐析、共溶剂沉淀及等电点沉淀等特点。三相分离技术可选择性地将目的蛋白分配到一相中, 而杂蛋白和杂质被分配到其他相中, 从而达到蛋白纯化和浓缩的作用。与硫酸铵分级沉淀相比, 三相法无需分步多级沉淀和脱盐处理, 也无需柱层析的繁琐操作, 一步即可分离, 收率也较其他多步分离方法较高[1]。
过氧化物酶是植物体内普遍存在的、活性较高的一种酶,它与植物代谢及抗逆性都有密切关系[2]。它的作用具有双重性: POD 可在逆境或衰老初期表达,表现为保护效应; POD 也可在逆境或衰老后期表达参与活性氧的生成,是植物体衰老到一定阶段的产物,甚至可作为衰老指标[3]。植物过氧化物酶易于提取,且不同种植物过氧化物酶具有差异性,故从不同植物中寻找低成本和酶学性质优良的过氧化物酶十分重要[4-6]。
过氧化物酶泛存在于生物界中,主要催化和有机过氧化物对多种无机物和有机物的氧化作用作为一种抗氧化剂,参与了生长激素的氧化、次生物质的代谢、细胞的木质化和植物防卫反应等多种生理反应过程该酶现已广泛应用于环保、食品工业、医学诊断、生物传感器等行业[7]。目前,该酶主要来源于辣根中,且国内该酶大部分来源靠进口,因此寻找低成本来源的尤为重要[8]。酶的理化性质,如最适pH、最适温度以及热稳定性和酸碱稳定性,在其应用中很重要.不同来源的过氧化物酶理化性质不一样[9],目前商品化的HPR酸碱耐受性较差,且热稳定性也不高[10]。.与HPR相比,番薯过氧化物酶是一种良好的耐酸碱、耐热的过氧化物酶,可以弥补HPR的不足,能够替代HPR应用在更广的领域内[11].
来源于番薯的过氧化物酶是一类可催化由过氧化氢参与的氧化各种还原剂的氧化还原酶,可应用于酶联免疫测定、诊断试剂、生物传感器、有机合成和污染治理等[12-13]。
参考文献:
[1]魏胜华,周清华,钱伟,张驰.三相法制备木瓜蛋白酶的过程研究[J].现代化工,2017,37(10):114-117.
[2]李霞,韩凤,何睿,焦艳华,梁媛媛,陈灿玉,谢恬.番薯过氧化物酶的分离纯化及其性质研究[J].杭州师范大学学报(自然科学版),2011,10(03):253-257.
[3]Phanuphong Chaiwut,Punyawatt Pintathong,Saroat Rawdkuen.Extraction and three-phase partitioning behavior of proteases from papaya peels[J].Process Biochemistry,2010, 45:1172-1175.
[4]刘金磊,苏涛,李典鹏,卢凤来.苦瓜过氧化物酶的提取分离及性质测定[J].广西科学,2007(04):407-410.
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