小鼠肠道内乳酸乳球菌定植分布及蛋白定量实验方案文献综述

开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）

1.研究背景

1型糖尿病（T1DM），又名胰岛素依赖型糖尿病(IDDM)或青少年糖尿病。是由于自身免疫系统缺陷或遗传因素导致胰岛细胞受损，从而部分或完全失去了产生胰岛素的功能。在体内胰岛素绝对缺乏的情况下，就会引起血糖水平持续升高，出现糖尿病。如今糖尿病的治疗方法很多，但都有些许不足。更加安全、有效、便捷、易于推广的糖尿病治疗方法就成为了患者以及相关研究者期待已久的愿望。

乳酸类细菌(Lactic acid bacteria，LAB)是一类公认的对人体及动物无致病性的、在食品和医药医疗领域具有重要应用价值的食品级微生物。选择乳酸菌作为表达宿主菌是因为其具有益生作用，能通过改善人和动物菌群平衡而对机体产生有利的影响，如提供营养物质、改善胃肠道功能、抗肿瘤以及预防癌症等，还能促进小肠局部细胞免疫和体液免疫。乳酸菌控制着人体生态菌群的平衡，不断清除有毒物质，抵御外来致病菌的入。乳酸菌作为一种理想的黏膜输送载体，具有抗原性弱、不产生胞外酶的优点。

正是基于乳酸菌的这一系列优良性状，使得近年来乳酸菌除了在传统的乳制品发酵、益生菌的应用等方面获得广泛应用外，乳酸菌工程菌在口服疫苗的研制，外源蛋白的表达等方面也得到越来越广泛的关注和应用。P277及其改造型IA2P2是治疗1型糖尿病的疫苗，课题组正在进行乳酸乳球菌作为递呈载体将其呈递到小肠部位使机体产生耐受，关于乳酸菌在体内的生长情况及蛋白疫苗量相关信息需要确定。

本实验通过测定小鼠肠道内乳酸乳球菌存活数目以及定植分布和蛋白量的确定可以为pHJ:HSP65-6P277和pCYT:HSP65-6IA2P2对1型糖尿病的治疗效果提供数据支持。

2.拟研究的问题

1）给药后小鼠肠道内乳酸乳球菌数量及定植分布

2）小鼠肠道内蛋白的鉴定以及定量分析

3.实验流程