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使用电感耦合等离子体光学发射光谱法测定蜂蜜样品中的重金属
Hasan Mohammadi,Aghamirlou,Monireh Khadem,Abdolrasoul Rahmani, Marzieh Sadeghian,Amir Hossein Mahvi1,Arash Akbarzadeh and Shahrokh Nazmara
摘 要
背 景:蜂蜜是含有碳水化合物和其他微量物质的复杂混合物。蜂蜜中微量成分浓度过高可能会威胁人体健康。因此,测定蜂蜜中的金属元素有助于其作为食品的质量控制。本研究的目的是测定伊朗蜂蜜中某些金属的浓度。
方 法:这项研究在伊朗的阿尔达比勒省的四个地区进行。蜂蜜样品(n=25)在微波炉中用硝酸和过氧化氢消解,然后用电感耦合等离子体-光学发射分光光度法(ICP-OES)进行分析。
结 果:各区域之间的镉、锌、镍和铬含量没有显着差异(P>0.05)。在蜂蜜样品中,锌含量最高(1481.64mu;g/kg)。由于东部地区工业的存在,一些金属的浓度较高。东部地区铅含量均值最高,为935.48mu;g/kg,南部地区最低,为205.4mu;g/kg。将金属浓度与推荐的食品限值进行比较,其中一些高于标准水平(铅),一些低于标准水平(镉)。
结 论:金属在工业生产过程释放到环境中,并通过植物从受污染的土壤或水中吸收进入食物链。不同地方的金属浓度存在许多变量,导致蜂蜜中的金属浓度不同。建议采取食品质量控制、农业区土壤监测、限制化肥使用等控制措施。
关键词:蜂蜜;电感耦合等离子体光发射分光光度法;重金属
背 景
蜂蜜由蜜蜂生产,是一种天然的过饱和糖溶液,作为高营养价值的食物被食用,其由碳水化合物的复杂混合物组成[1]。这种天然产品非常有价值,是世界上唯一的浓缩形式的糖[2],也可以用作食品防腐剂。它还含有某些次要成分,如酶(葡萄糖氧化酶、过氧化氢酶、磷酸酶)、葡萄糖和蔗糖(占总可溶性固体的65-75%)、蛋白质、氨基酸和有机酸、维生素、脂类、挥发性化学品、类黄酮、酚酸和矿物质[3,4]。蜂蜜的生化特性和品质与蜂蜜的成熟度、气候条件、生产方法、加工和贮藏条件以及蜂蜜的蜜源有关[5-9]。
蜂蜜中有微量元素,蜂蜜中这些元素的种类与蜜蜂采集的花蜜、花粉和蜂蜜露水等花卉原料的种类有关[10-13]。不同蜂蜜中的金属浓度在很大程度上取决于花的元素组成,以及它们的植物学和地理起源[14,15]。这些金属可能由外部原因产生,如工业冶炼厂污染、工业单位排放以及蜂蜜加工和维护阶段的不当工序。此外,蜂蜜中金属的来源可能是农用化学品,如有机汞,含镉肥料和含砷农药(图1)[14-16]。
蜂蜜
花蜜
土壤
植物
蜜蜂
大气
水体
污染
图1 蜂蜜中天然和人为的金属来源
蜂蜜中金属的存在可能威胁到人类作为消费者的健康[17]。当这些金属积累到有毒浓度水平时,会损害人类的生活质量[18]。近年来,中国[17]、意大利[14]、法国[19]、克罗地亚[4]、斯洛文尼亚[20]、波兰[21]和土耳其[22-25]等一些国家测定了蜂蜜中不同金属的浓度。此外,蜜蜂和蜂产品中的重金属已成为许多其他各种研究的主题。
由于采矿、冶炼和金属处理行业的存在,重金属污染是伊朗的一个严重问题。重金属污染不仅影响了生产质量,还影响了大气和水体质量,并通过食物链威胁人类和动物的健康和生命。虽然伊朗的蜂蜜生产和消费规模很大,但缺乏能确定伊朗蜂蜜中重金属的信息。除了对环境的重要性之外,作为最复杂的食品之一的蜂蜜,确定重金属对其质量控制至关重要。因此,本研究的目的是确定伊朗蜂蜜中的重金属的浓度,如:铜(Cu)、锌(Zn)、镉(Cd)、铅(Pb)、砷(As)、镍(Ni)、铬(Cr)等。这些研究成果有助于预防上述提到的问题并提高健康的蜂蜜消费。这些结果可以引导我们考虑蜂蜜中污染物的来源,例如土壤类型和大气污染、在卫生政策方面关注食品安全,提供最佳的食品质量,保护公共卫生,保持消费者的信心。
方 法
样品采集
这项跨地区研究于2013年在伊朗西北部的阿尔达比勒省进行。这些年从阿尔达比勒省的四个不同地区的个体养蜂人中采集了25份多花蜂蜜样品:东部(阿尔达比勒县,n=6),北部(莫汉县,n=7),南部(哈尔哈尔县,n=6)和西部(梅什金沙赫尔县,n=6)(图2)。与其他地区相比,尤其是南部和北部地区,东部地区人口最多、城市化和工业化程度最高。
哈尔哈尔县
莫汉县
阿尔达比勒县
梅什金沙赫尔县
图2 阿尔达比勒省中四个研究地区的地理位置
所有蜂蜜样品(400g)均由当地养蜂人协会提供,产地有保证,并且是在使用传统蜂蜜制作方法的地区。所有样品均收集在干净、密闭的玻璃罐中,并立即送到德黑兰医科大学的环境卫生系的实验室。将所有样品置于玻璃瓶中保存,并在暗中保持在4-8℃,直至分析。
仪 器
使用八极杆反应系统(ORS)电感耦合等离子体——光学发射分光光度法(ICP-OES),Spectro Arcos OES EOP(德国)的设备进行重金属的测定。表1展示了进行全金属分析的ICP-OES操作条件。使用微波炉(MARS 5 CEM)对样品进行消化和预处理。微波消解样品的仪器参数设置为:15 min/600 W ,120°C, 20 min/600 W ,180°C,20分钟排气。
表1 ICP-OES的仪器特性和设置
光谱仪 |
带ORS的安捷伦7500ce |
喷雾器 |
微雾 |
接口 |
接口 |
射频发生器(W) |
1550 |
氩气流量(L min-1) |
0.85 |
雾化器泵(rps) |
0.10 |
扫描条件 |
平行测定次数5,扫描时间1s |
扫描模式 |
脉冲 |
还原气流量 |
|
H2 |
3.5 |
He |
4.0 |
内标 |
45Sc,89Y,159Tb |
试剂和化学品
除非另有说明,所有试剂均为分析纯试剂。采用Milli Q净水系统(密理博)生产的双去离子水作为稀释液。从Merck公司(德国)采购Cu、Cr、Cd、Pb、As、Ni和Zn的储备溶液(1000mg/l,ICP标准CertiPUR),并通过稀释制备元素标准溶液。采用相同的步骤制备45Sc,89Y,159Tb,作为ICP-OES技术的内部标准。在ICP-OES常规分析中,建议使用内标,以抵消长期运行可能出现的偏移,并纠正基体效应。蜂蜜样品用浓硝酸(65%HNO3,超纯,Merck,德国)和过氧化氢(30% H2O2,纯试剂,Chempur,波兰)消解。
分析方法
为了测定上述七种金属,所有蜂蜜样品均按照以下程序制备:在聚四氟乙烯容器中精确称取1克样品,并溶解于10毫升浓硝酸中(HNO3)。然后将样品置于微波炉中消解[25]。这个过程是在一个封闭的系统中进行的,样品的分解与外部环境没有接触,从而降低了被污染的风险。空白溶液用硝酸制备。
ICP-OES技术能够进行多元素分析,具有灵敏度高,样品通量大的特点,从而实现高准确度和精密度。所以它被用于测定蜂蜜中特定的重金属,与其他研究类似[14]。一些研究中采用原子吸收光谱和发射光谱进行重金属的分析和测量 [33]。
根据实际样品实验结果的重复性来评价分析方法的精密度,用标准差(S.D)表示。通过校准(使用标准溶液)曲线来验证准确度。此外,将内部标准(45Sc,89Y,159Tb)应用于ICP-OES技术,以纠正基体效应。
数据分析
统计计算和分析采用SPSS第18版(SPSS公司,芝加哥,伊利诺伊州,美国)。一些测试如单因素ANOVA分析和T检验用于数据分析。显着性水平取p<0.05。
结 果
为了保证试验结果的可靠性,采用加标蜂蜜对Cu、Cr、Cd、Pb、As、Ni和Zn进行回收率分析。金属回收率达95-100%,具有很好的准确性(表2)。蜂蜜中主要含有矿物质元素,如钙、铜、铁、镁、锰、钾等矿物质,本研究采用空白样品来获得准确的数据。空白蜂蜜样品经鉴定不存在特定的化合物(重金属),并事先进样至检测系统。
表2 加标蜂蜜样品中重金属的含量及回收率
元素 |
合格值(mu;gg -1) |
测定值(mu;gg -1) |
回收率(%) |
As |
5.67 |
4.68plusmn;0.30 |
95 |
Cd |
0.013 |
0.013plusmn;0.001 |
100 |
Cu |
5.64 |
5.60plusmn;0.20 |
99 |
Pb |
0.47 |
0.45plusmn;0.03 |
97.2 |
Zn |
12.5 |
10.9plusmn;0.9 |
88.4 |
Cr |
0.3 |
0.29plusmn;0.03 |
99 |
Ni |
0.91 |
0.87plusmn;0.04 |
96 |
表3展示了蜂蜜样品中的金属浓度。可以看到诸如样品数量、平均值、最大值和最小值。在所有蜂蜜样品中,锌是含量最高的金属,平均值为1481.64mu;gkg-1(范围从122.86至6638.55mu;gkg-1)。与锌相比,其他主要金属,如Cu、Cr、Cd、Pb和Ni的平均值较低。在本研究中,镉含量最高的是东部地区,最低的是北部地区。各地区的镉含量没有明显差异(P=0.107)。此外,各地区锌、镍和铬的含量也没有明显差异(P>0.05)。
方差分析表明,不同地区蜂蜜样品的铅含量存在显著差异(P=0.002)。此外,铅含量平均值最高的是东部地区,为935.48mu;gkg-1,铅含量平均值最低的是南部地区,为205.4mu;gkg-1。铜含量平均值最高和最低的地区分别为西部和北部地区。各区域铜含量无明显差异(P=0.374)。
讨 论
本研究的目的是测定蜂蜜中重金属的浓度。值得一提的是,没有文献研究过伊朗蜂蜜中的金属含量和形态。
根据我们的发现,平均铜浓度最低和最高的地区分别是北部(94.74mu;gkg-1)和西部地区(591.49mu;gkg-1)。四个地
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