1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
1菊花再生遗传转化体系的研究意义
菊花作为世界四大切花和我国十大传统名花,在我国有着悠久的栽培历史。其品种繁多,花型多样,花瓣有平瓣、匙瓣、桂瓣等,颜色丰富,极具观赏性,正受到越来越多人的喜爱,这使菊花新品种的培育显得尤为重要。在菊花育种进程中杂交育种是最有效的途径之一,但随着花卉市场的发展和人们观赏水平的提高,传统的常规杂交育种因受亲本性状、杂交结实率低及环境等因素的影响,已越来越不能满足市场对新型品种的要求。随着植物基因工程技术的发展,通过基因工程改良性状己经逐渐成为植物定向遗传改良的重要手段。由于菊花的品种繁多、遗传背景复杂,不同基因型菊花的再生能力也各不一样[1]。研究表明,基因型差异是影响菊花再生的主要因素[2]。horsch等[3]在农杆菌介导法转化试验中,利用叶盘转换法,通过对多个不同品种的菊花进行再生试验,发现不同品种的菊花有着较大差异的遗传转化率,表明菊花的转化效率依赖于品种。因此,针对不同基因型菊花品种建立高效再生和遗传转化体系,已成为菊花分子育种首要解决的问题之一。
2菊花再生遗传转化体系的研究进展
2. 研究的基本内容和问题
1 研究的目标
1.1筛选出再生频率最高的盆栽菊品种,明确其最适合的再生条件。
1.2对再生频率最高的盆栽菊品种建立遗传转化体系。
3. 研究的方法与方案
1研究方法与实验方案
1.1试验材料与试剂
供试材料为盆栽小菊品种‘微风深红’、‘花洒绿色心情’、‘色彩火山’、‘微风橙绿’、‘微风玫瑰’、‘微风索尔’、‘青柠水晶’、‘梦幻粉水晶’、‘红水晶’、‘微风红霞’和‘粉色’,取自南京农业大学中国菊花种质资源保存中心。供试根癌农杆菌(agrobacterium tumefaciens)菌株eha105,质粒pcambia1301-gus由南京农业大学菊花遗传育种与分子生物学实验室提供。gus染液购自华越洋生物技术公司。
4. 研究创新点
目前的再生和转化体系多针对切花菊‘神马’等品种,其株型高大、生长周期长,不利于转基因功能鉴定等研究。本实验选用的盆栽小菊品种具有株型矮小、生长周期短等特性,建立其完善的再生和转化体系,有利于组培快繁与分子育种相关工作的开展。
5. 研究计划与进展
2019.2- 2019.3获取材料
2019.4- 2019.8组织培养、分析最佳条件
2019.9- 2020.2进行转化、获得最优转化条件
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