菊花基因CmERF3互作蛋白的筛选及验证开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

（1）课题意义

菊花（chrysanthemummorifolium）是菊科菊属的一种多年生草本植物，是我国的十大传统名花之一，也属于世界四大切花之一，与梅兰竹并称“花中四君子”，文化底蕴深厚，有重要的观赏应用价值。常规杂交育种的方法对于菊花育种来说具有很大的局限性，而转基因育种目前已成为菊花新品种培育的重要手段，研究菊花基因的相关信息对分子育种有重要推动作用。

erfs是植物中特有的一类转录因子，在植物的生长发育以及对多种生物和非生物胁迫应答反应中起重要作用[1]。菊花基因cmerf3属于erf亚家族中的一员.本研究主要致力于对菊花基因cmerf3互作蛋白的筛选及验证，旨在初步探索该基因的部分功能。

2. 研究的基本内容和问题

（1）研究目标

①通过酵母双杂技术，从菊花花芽分化库中筛出与该基因互作的蛋白。

②多种途径重新回复验证。

3. 研究的方法与方案

（1）研究方法

实验首先以诱饵载体pgbkt7-cmerf3的质粒与花芽分化的cdna文库质粒杂交后共转y2h酵母菌株，经过一系列的筛选、测序、比对过程，获得cmerf3基因的互作蛋白，再利用通过酵母双杂及烟草bifc进行回复验证。

（2）技术路线

4. 研究创新点

目前对菊花CmERF3的功能研究未见报道，本实验首次通过筛选其互作的已知功能的蛋白来揭示该基因的部分功能。

5. 研究计划与进展

1. 2019年3-4月：与指导老师沟通交流，确定正确的研究思路，不断查阅文献加深对更多研究背景和方法的了解。

2. 2019年5-6月：进行cmerf3的互作蛋白筛选和测序结果的比对与整理分析。

3. 2019年9-11月：互作蛋白的互作验证。