森林草莓CRISPR/Cas9基因编辑技术应用开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

一、研究意义

草莓属于蔷薇科草莓属，多年生草本植物，因果实色泽明艳、香味独特、口感好、营养丰富，受到人们的喜爱。草莓营养价值丰富，含有多种维生素、胡萝卜素、氨基酸等营养物质，维生素c含量比苹果高7~10倍，被誉为“水果皇后”。^[1] 栽培草莓（fragaria × ananassa duch.）是蔷薇科最重要的水果作物,也是世界上最广泛种植和消费的水果之一，2016年全球产量达到910万吨。^[2]

栽培种草莓为八倍体，杂合度高，基因组复杂。森林草莓（fragaria vesca l. , 2n=14）为二倍体，是八倍体栽培草莓四个祖先种之一。森林草莓植株较小，易于遗传转化，且有一个高质量的基因组序列(240mbp)，是栽培草莓和蔷薇科植物的理想模式植物。^[3]

2. 研究的基本内容和问题

（一）研究目标

本研究以fragariavesca（’haweii4’）的二倍体森林草莓品种为实验对象，利用crispr/cas9技术，突变其topless基因，通过测序的方法验证topless基因突变并获得突变体。

（二）研究内容

3. 研究的方法与方案

（一）研究方法

1. 实验材料：

实验拟于南京农业大学草莓课题组进行，选取40余罐已转化的’ haweii4’森林草莓，取植株顶端新梢上的幼嫩叶片，用锡箔纸包装，暂时保存于液氮中，最后置于-80℃冰箱保存。

4. 研究创新点

特色或创新之处

1. 以fragaria vesca（’haweii4’）二倍体森林草莓品种为实验材料，利用crispr基因编辑对蔷薇科模式植物进行反向遗传学探索。

2. 编辑草莓topless基因，为探索其对草莓生长发育的作用提供实验材料。

5. 研究计划与进展

1.2019年10-12月

（1）前期准备，查阅文献资料，学习分析方法；

（2）培育已转化的供试材料。