草莓中农杆菌T-DNA插入位点特征研究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1.课题研究意义

1.1理论作用意义

在如今的转基因遗传实验中，遗传转化效率不高是园艺植物遗传学研究的一个难题。然而t-dna整合到植物基因组的有效性对于遗传转化效率有着重要影响。因此研究t-dna插入位置的序列特征、及插入位点的染色质结构特点，是提高遗传转化效率的一个重要途径。本课题拟定位出已有转基因森林草莓植株中的转化插入位点，并对农杆菌介导转化的t-dna插入位点进行特征研究，如关于序列偏好及染色质结构偏好的分析。这对于提高草莓等蔷薇科植物的遗传转化效率也有重要的借鉴作用。

2. 研究的基本内容和问题

4.研究目标

①提取实验所需的转基因森林草莓植株幼叶dna。

②对农杆菌介导转化后t-dna在森林草莓染色体中的锚定位点进行定位。

3. 研究的方法与方案

7.研究方法

①用ctab法提取已转基因森林草莓植株的幼叶dna。

②用染色体步移技术获得t-dna的插入位点片段。

4. 研究创新点

11.本实验的特色创新之处

农杆菌介导的T-DNA插入是植物遗传学研究的一个重要手段，在模式植物如拟南芥等具有广泛代表性的植物中已经开展了一些关于农杆菌介导T-DNA插入位点的特征的研究，对于理解T-DNA是如何插入植物基因组提供了一些数据和结果。但是在园艺作物中还未开展关于T-DNA插入位点的研究。插入位点的特点往往会影响植物的遗传转化效率，而遗传转化效率不高仍是园艺植物研究、尤其是果树研究的一个瓶颈。所以本实验拟通过对森林草莓中农杆菌介导转化DNA的整合位点进行定位以及对其序列特征和染色质结构进行偏好分析，可以为今后农杆菌转化提高效率和稳定性提供一个数据参考，也将对提高蔷薇科植物的遗传转化效率有重要的借鉴作用。

5. 研究计划与进展

12.研究计划及预期进展