不同处理组合对‘阳光玫瑰’果实外观品质以及无核化的影响与综合分析开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1. 本课题的意义、国内外研究概况以及应用前景

‘阳光玫瑰’属欧美杂交种，中晚熟，有核，浆果黄绿色，肉质脆硬，具有浓郁的玫瑰香味。该品种自2009年从日本引入我国，经九年种植，栽培技术已经成熟，销售市场已经形成，已出现667m²，产值达到5到10万元的葡萄园，是我国30多年葡萄发展中创造667m²产值最高的品种^{[1] [2]}。目前‘阳光玫瑰’因易栽培、生长势强、品质佳的优点逐步成为国内主栽鲜食葡萄品种，深受消费者喜爱^{[3] [4]}。该品种易于无核化，且无核化的风味更好，但其在赤霉素（ga）诱导无核化过程中容易出现大小粒，大果也易空心。为解决这些问题，本研究以‘阳光玫瑰’为试材，在前人研究及预试验的基础上，探究不同激素不同浓度对其无核及其果实品质的影响，筛选适于该品种处理的最适激素及最适浓度，探究不同激素不同浓度对果实无核化及品质的影响。

1.2国内外研究进展

2. 研究的基本内容和问题

2.1研究目标及内容

（1）探究不同浓度的褪黑素对葡萄果实品质以及种子发育的影响。

在花后两天分别用不同浓度的褪黑素分别与赤霉素，赤霉素抑制剂多效唑组合进行蘸穗处理，定期观察果实生长情况，找出最适宜处理组合。

3. 研究的方法与方案

3.研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析

3.1研究方法

（1）查找文献法

查阅最近的相关文献，综合考量，确定了最适宜的赤霉素浓度25PPM以及多效唑最适宜浓度50PPM（是在‘魏可’这个品种中），并确定了处理组合以及实验方案。

（2）观察法

最直观的观测指标，用于对果实的品质指标的衡量与测定。

（3）实验法

通过对果实的激素含量，糖酸比等进行试验鉴定含量，选出最好的处理组。

3.3 实验方案

3.3.1激素处理

共进行两次激素处理，第一次于花后两天处理，共设置22组处理，如图1（单位：PPM）。第二次于花后两周统一用GA₃ 25PPM CPPU 3PPM 进行蘸穗处理，目的是利于果实的膨大。

图1 第一次激素处理的处理组

3.3.2测量指标

（1）果穗的观察与测量

定期对果穗进行拍照，测定果穗的长宽，观察整个果穗的生长情况。

（2）果实外观

定期采样，对单个果实的重量，横纵径进行测定，观察果实的外部形态，纵向观察果实在整个生长时期的变化趋势。

（3）体式显微镜观察

在体视显微镜下观察果实横纵切，并粗略观察果实内部的发育，以及胚的发育情况。

（4）石蜡切片的制作

每次采样要留一部分用于FAA固定，经过体式显微镜观察，确定几个重要时期，分别制作果肉、果皮、胚的石蜡切片，从细胞角度观察其生长情况。

（5）间苯三酚（phloroglucin）测定木质素

分别对不同发育时期的果实样品进行横切和纵切，向切面滴加间苯三酚溶液至完全覆盖切面，静置3 min左右再滴加38%浓盐酸至完全覆盖切面，其中的木质素组织即刻呈现出粉红色，完全显色后，放置在体视显微镜下进行拍照记录。

（6）种胚活力检测

TTC溶液常用作种子活力检测的试剂。剥离胚珠（种子）之后，用1%TTC进行染色，然后在体视显微镜下进行拍照记录。

（7）糖酸，激素生理指标的测定

每次采样都预留足够的冻样。从冻样中取适当样品，使用液相色谱仪的方法测定其具体含量。

（8）基因表达分析

每次采样都预留足够的冻样。每个样品取冻样3ug作为起始材料，进行RNA的提取^[5]。

4. 研究创新点

4. 特色或创新之处

（1）不同于大部分的实验对‘阳光玫瑰’使用ga₃与cppu两种激素，而是根据前期研究基础增加水杨酸，褪黑素这两种激素，同时使用ga抑制剂验证不同激素对‘阳光玫瑰’无核化的效果。

(2）不同于大部分实验研究处理对于葡萄果实品质的影响，本实验重在观察胚的发育，种子败育的无核化进程，生产与科研并重。

5. 研究计划与进展

5. 研究计划及预期进展

2019年5月中旬：对‘阳光玫瑰’进行花后两天激素处理。

2019年5月初-8月下旬：定期采集样品并对新鲜样品进行直接测定观察。