耐寒不结球白菜不同倍性品种比较及理化特性开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1.国内外研究动态

不结球白菜(brassica campestris ssp.chinensis makino)又名普通白菜、小白菜、青菜，是十字花科（cruciferae）芸薹属芸薹种白菜亚种的一个变种，以绿叶为产品的一二年生草本植物，染色体数2n=2x=20，为我国长江流域及其以南地区普遍栽培的一种大众化蔬菜^[1,2]。不结球白菜原产于中国，其品种类型繁多，可周年栽培，周年供应，为中国南方栽培面积最大、最大众化的蔬菜作物。

多倍体是自然选择和植物进化的一个关键特性，也是植物适应性和物种形成的主要机制。多倍体植物与二倍体相比，一般都会出现明显不同的特征，具体表现在形态、生态、生理及细胞遗传学性状上（levin,1983；lumaret,1988）^[3-5]：（1）器官和组织变大；（2）生长和发育减慢；（3）生物化学和次生代谢成分增加；（4）抗逆性增强；（5）营养成分增加（刘文革，2003；刘惠吉，1994；杜先明，1995）^[6-8]。

2. 研究的基本内容和问题

研究目的

1. 比较二四倍体不结球白菜的农艺性状、营养品质

2. 比较二四倍体不结球白菜的耐寒性、抽薹性

3. 研究的方法与方案

研究方法

1.试验材料

供试材料6份，二倍体不结球白菜品种： 13P秋-9， 13P秋-7，13P秋-6；13PY-36；四倍体不结球白菜品种13P秋-13，13P秋-8原，其中13P秋-7作对照。种子由南京农业大学园艺学院白菜系统生物学实验室提供。

2.试验方法

二、四倍体材料于2013年9月28日播种于园艺学院实验基地江浦农场，田间试验采用完全随机区组设计，按常规方法进行田间管理，11月3日进行定植。小区面积10 m², 株行距 20 cm20cm, 3 次重复。待冬至之后南京市浦口区温度开始处于零度以下，在温度降到零度以下时，冬至之前，提前将一部分材料转至塑料拱棚内，做好保温措施，保证全日温度均处在零度以上，待田间连续三天零度低温之后取样，同时做好气温纪录。取第6片叶测定各项指标，三次重复。

2.1二四倍体不结球白菜的农艺性状观察

2012年3月, 每小区取10 株。测定比较二、四倍体不结球白菜的农艺性状：株高、叶长、叶宽、柄长、柄宽、开展度均用直尺测量；柄重、单株重、菜头重用电子天平测量。各项指标均重复测定10次。

2.2二四倍体不结球白菜耐寒性比较鉴定

根据植物的形态学表型性状，将不结球白菜抗寒性划分为不同等级：0级，1级，2级，3级，4级。

2.3二四倍体不结球白菜抽薹性比较鉴定

调查二、四倍体不结球白菜的抽薹期，记录抽薹指数

2.4二四倍体不结球白菜营养品质比较测定

2013年2月下旬产品器官成熟时，除去边株，取样，每小区各品种选取10 株，单株去根，去黄叶，洗净晾干。将可食部分切碎，按四分法取样，测定其营养成分含量^［18］。主要指标有：可溶性糖、可溶性蛋白、叶绿素、维生素c、硝态氮

可溶性蛋白的测定，采用考马斯亮蓝G-520染色法^[19]：称0.2g材料，加750μl蒸馏水研磨，750μl蒸馏水冲洗，转入2ml离心管，4℃10000r/min离心15min，取上清液100μl，加3ml考马斯亮蓝G-250蛋白试剂，充分混合，放置2min，595nm处测定吸光度。

可溶性糖的测定，采用蒽酮比色法^[20]：称1.0g材料，剪碎，放入研钵中，加5ml蒸馏水研磨，沸水浴30min，重复抽提两次，定容至15ml。取0.05ml提取液于试管中，加1.95ml蒸馏水，加0.5ml蒽酮乙酸乙酯，加5ml浓硫酸，充分震荡，沸水浴1min，冷却至室温，630nm处测定吸光度。

叶绿素的测定，采用丙酮乙醇混合液法^[21]：称0.15g材料，加5ml反应混合液（乙醇：丙酮＝1：1），于暗处浸提24 h，分别在663 nm、645nm处测定吸光度。叶绿素的含量按丙酮法的公式^[22]计算，即：

C_a=12.7A₆₆₃-2.59A₆₄₅ C_b=22.9A₆₄₅-4.67A₆₆₃ C_{a b}=20.29A₆₄₅ 8.05A₆₆₃

硝态氮的测定^[23]：称1.0g材料，剪碎，放入研钵中，加5ml蒸馏水研磨，沸水浴30min，重复抽提两次，定容至15ml。取0.1ml提取液，加0.4ml5％水杨酸-硫酸溶液，

室温放置20min，加8％NaOH溶液9.5ml，摇匀，冷却至室温，410nm处测定吸光度。

试验数据用SAS软件和Excel软件进行统计分析。

技术路线

帅选出综合品质相对比较好的不结球白菜品种

可行性分析

1、本实验材料来源可靠，实验项目组为国家蔬菜重点实验室，多年来研究成果卓越。指导老师已从事蔬菜育种研究多年，发表数篇关于白菜育种的相关论文。该实验操作技术成熟，实验技术路线合理。

2、试验者已学习相关知识已久，并且长期在实验室中进行试验，成熟的操作技术及能力为试验成功奠定了基础。

4. 研究创新点

采用多倍体育种也是解决不结球白菜耐寒品种短缺问题的途径之一。

本研究对5个不结球白菜的耐寒品种采用完全随机区组设计进行品种比较试验，测定并分析其农艺性状、抽薹时间及营养品质，以期为耐寒不结球白菜的生产提供理论依据。

5. 研究计划与进展

2012年8月-9月 查阅相关文献，确定试验方案和技术路线

2013年9月22日 田间播种不结球白菜种子（撒播）

2013年10月18日 大田完全随机区组定植种苗