“迎霜”茶苗叶片蛋白双向电泳体系的建立开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

基因组研究从1990年正式实施到今天已经取得了巨大的成就，开始步人后基因组时代。然而，随着核酸序列信息的快速增长，更激发了高通量、大规模地研究基因产物蛋白质的需要，在此背景下产生了蛋白质组学研究^[1]。

蛋白质组(proteome)最早是由wilkins和williams于1994年提出的(wasinger等1995)。随着后基因组时代的到来，蛋白质组学(proteomics)已经成为生命科学研究的重心^[2]。

随着生命科学研究进入功能基因组时代，双向电泳技术（two-dimensional electrophoresis,2-de）作为一种有效的蛋白质分离技术在蛋白质组学研究中得到广泛的应用^[3]，是目前常用的唯一一种能够连续^[4]在一块胶上分离数千种蛋白质的方法，同时2-de已成为差异蛋白显示、基因产物识别、环境反应与调节等热点领域的一种十分有效且应用广泛的研究手段^[5-8]。原理为：首先通过电荷分离蛋白质，利用一向等电聚焦将蛋白质沿 ph 梯度分离至各自等电点；然后沿垂直的方向通过非连续十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳，根据蛋白质分子量大小差别来达到分离的目的。所得的蛋白双点是基于电荷分离和分子质量大小分离的正交组合，分布于整个二维凝胶图谱上，每个点代表其中一个或数个蛋白质，而蛋白质的分子量、等电点在样品中的含量也可显现出来^[9]。

2. 研究的基本内容和问题

研究目标

以茶树（camellia sinensis）品种迎霜为材料，比较蛋白的不同提取方法（三氯乙酸-丙酮法和tris-hcl法）、ipg胶条ph梯度（ph 3-10、ph 5-8、ph 4-7）、上样量（1.0 mg、1.6 mg、1.8 mg、2.2 mg）、分离胶浓度和染色方法等条件，对迎霜茶苗叶片蛋白双向电泳结果的影响，筛选适宜的双向电泳条件。建立一套适合于茶树的双向电泳技术体系，为茶树蛋白质组学研究的开展提供理论依据。

研究内容

3. 研究的方法与方案

研究方法

实验室试验分析。

技术路线

4. 研究创新点

特色或创新之处

首次做关于蛋白质双向电泳的实验优化研究。本试验不是研究一项具体的实验数据，而是为了得到一组优化的实验影响因素，建立一套适合于茶树的双向电泳技术体系。为茶树蛋白质组学研究的开展提供理论参考。

5. 研究计划与进展

研究计划及预期进展

2013年05月2013年06月 查阅文献，确定课题方案，准备所需仪器材料

2013年06月2013年07月 进行预备试验，修订试验参数