南通小方柿的组织快繁技术研究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

本课题的意义、国内外研究概况、应用前景等（列出主要参考文献）

本课题的意义

柿果营养价值高,风味独特，果实营养丰富，含有大量脂肪、蛋白质、糖类等营养物质，以及钙、磷、铁等矿质元素和多种维生素，既可鲜食，又可加工成柿饼、柿子醋、柿子果酒等；柿叶可做茶，柿漆可供油伞用。柿树树姿优美，叶、果色泽艳丽，是一种良好的观赏树种。柿树为高大落叶乔木,通常树高7-9米。1982年江苏省进行果树资源调查时,在南通市发现了具有矮生性状的地方品种一一南通小方柿(当地俗称小方柿、四丫红)。该品种树体矮小,早果性好,且丰产稳定,果实色艳、无核、质优,能自然脱涩,是矮化密植栽培的优良柿品种。长期以来,许多果树工作者努力寻求具有矮化基因的柿树种质资源,而迄今为止,柿树的矮生型或矮化砧在国内外尚未见报道。因此,矮生型柿品种南通小方柿是我国珍贵的柿树种质资源,将对我国今后柿树的栽培、育种及其发展产生深远的影响。

2. 研究的基本内容和问题

研究的目标、内容和拟解决的关键问题

研究目标：

通过对不同培养基及植物生长调节剂的筛选，建立南通小方柿的组织培养体系及植株再生体系，形成南通小方柿快速繁殖育苗的新途径及为基因工程研究做准备

3. 研究的方法与方案

技术路线：

实验方案：

1、小方柿休眠芽初代培养

用75乙醇、10双氧水、0.1升汞、1次氯酸钠溶液对小方柿休眠芽进行消毒，筛选最适合小方柿初代培养的消毒方法及最佳消毒时间。将灭菌后的休眠芽，在无菌条件下剥去外部鳞片和外层3片叶原基后，切下顶端3mm左右的幼芽，接种到含有不同生长素和细胞分裂素的培养基中，观察生长情况。

2、小方柿组培苗继代增殖培养

萌动生长的休眠芽接于含有不同浓度的ZT、6-BA、IAA的MS、1/2MS、（1/2N）MS培养基中，观察统计增殖情况。培养基中加入不同浓度的GA，统计苗的生长高度。

3、小方柿组培苗叶片再生

将分别经0.1、0.2、0.3mg/L的IAA,NAA,IBA ,2,4-D和1.0mg/LTDZ诱导的叶片愈伤组织切割成约4mm*4mm*3mm大小,接入含有ZT3.0mg/l IAA 0.lmg/L的MS（1/2N）培养基中,比较不同来源愈伤组织的不定芽分化效果。

以上每个处理的外植体数为30个,40天后统计数据。

4、小方柿组培苗生根

添加激素法诱导生根：取20-30mm高的组培苗,留顶端2-3片展开的幼叶,分别在50,100,200,250,300mg/L的BA或IAA无菌溶液中浸蘸组培苗基部15-20min,之后接入1/2 MS(1/2 N)生根培养基中,暗培养10天后再进行16h/d光培养。将20-30min高的组培苗,接种到添加有0.5,1.0,2.0,4.Omg/LIAA或BA的1/2MS(1/2N)培养基中诱导生根。

4. 研究创新点

特色或创新之处：

长期以来,许多果树工作者努力寻求具有矮化基因的柿树种质资源,而迄今为止,柿树的矮生型或矮化砧在国内外尚未见报道。因此,矮生型柿品种南通小方柿是我国珍贵的柿树种质资源,将对我国今后柿树的栽培、育种及其发展产生深远的影响。国内还未对南通小方柿进行组织培养体系及植株再生体系的建立该方面研究。

5. 研究计划与进展

研究计划及预期进展

研究计划：

第一阶段：2013.03---2013.04查阅文献及相关资料，学习组织培养技术和植物再生体系相关方面的知识，实验材料的准备。