1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
1.1研究意义
葡萄(vitis vinifera l.)是世界上栽培面积最大的果树树种之一,也是人们最爱嗜食和加工产品最为丰富的水果。葡萄主要用于鲜食、酿酒、制汁和制干,为了不断满足生产和消费对葡萄经济性状的要求,对葡萄品质的不断改善与提高以及对葡萄发育过程中的动态研究一直是国内外葡萄育种工作者所关注的研究领域。
1.1.1 葡萄果实发育动态研究
2. 研究的基本内容和问题
2.1研究目标
葡萄果实中可溶性固形物、有机酸酸以及许多次代谢生产物是影响葡萄和葡萄酒质量的关键因素。因此,如何提高果实品质就成为众多科研领域关注的焦点。另外,就目前的有关报道看来,国内外对葡萄发育过程的研究较少,其焦点集中在无核葡萄胚挽救等领域,因而本研究旨在研究葡萄发育过程的动态变化,包括果实、果核及胚生长发育过程中鲜重、干重动态变化,及果实糖酸积累等,为今后葡萄的相关研究奠定理论基础。
本研究以保尔加尔、大粒六月紫、黑奥林、里扎马特、早玛瑙5个葡萄品种为试材,应用测糖仪、naoh滴定法等测定可溶性固形物和有机酸的含量,应用游标卡尺测量各发育阶段果实的纵、横径及果核的纵、横径。通过比较不同品种葡萄果实转色前后可溶性固形物含量及有机酸含量变化差异,为进一步提高和改善葡萄果实品质奠定基础;分析不同品种葡萄发育过程动态变化差异,进而全面了解葡萄果实在发育过程中动态变化,为进一步对果实生理生化及分子研究奠定基础。
3. 研究的方法与方案
3.1 研究方法
(1)果实鲜、干重测定:用天平测定果实鲜重、干重。
(2)可溶性固形物含量测定:采用测糖仪测定。
(3)有机酸含量的测定:参照张福庆等的方法,采用NaOH滴定法。
(4)数据分析统计:采用Excel、SPSS等软件统计及相关性分析。
3.2 技术路线
用Excel,SPSS等统计分析数据, 并总结果实发育动态变化特征 |
分时期采集保尔加尔、大粒六月紫、等5个葡萄品种 |
果实、果核及胚的鲜、干重及纵横径 |
可溶性固形物含量测定 |
有机酸含量测定(以酒石酸表示) |
3.3 实验方案
3.3.1实验材料
试材为种植于江苏省农业科学院果树种质圃适应性强、果粒大小均匀、果形适中的保尔加尔、大粒六月紫、黑奥林、里扎马特、早玛瑙5个葡萄品种,于2013年5月中旬-6月下旬一次果期进行分阶段采集样本。
3.3.2 测定鲜、干重及测量纵、横径
采集当天取10个果实样品纵剖后取出果核,用分析天平称果实及果核鲜重,每次取平均值。再将每次解剖观测完的10个果实样品(包括果核及胚)放入培养皿中,在烘干箱中(50-60℃)烘干后称果实干重,每次取平均值。
3.3.3可溶性固形物含量测定采用手持测糖仪测定,取果肉吸取汁液均匀涂在仪器上,计数,重复3次,取平均值。
3.3.4有机酸含量的测定
采用氢氧化钠滴定法,用酒石酸表示可滴定酸百分比含量。准确称取 5 g 果肉或果皮,研磨成匀浆后过滤定容到50mL作为样液,然后再加入酚酞指示剂3~5滴,用0.1 mol/L氢氧化钠标准溶液滴定,直至样液出现微红色且30 s内不褪色为终点,记下所消耗的体积,最后计算出结果。
3.3.5 解剖结构观测
将果实分别横、纵切后,用立体显微镜观察不同时期果核及胚结构特征,并比较其变化。
3.4 可行性分析
已基本掌握一定的实验方法和实验技巧,以及实验分析和应变能力,对实验仪器的使用有一定的了解。能够熟练应用Excel、SPSS等相关数据统计分析软件。指导老师在葡萄领域从事相关研究多年,具有丰富的经验和指导能力。4. 研究创新点
(1)基于国内外对葡萄果实发育动态研究,分析比较不同葡萄品种果实生长发育动态异同,为研究葡萄果实分子机理奠定基础。
(2)国内外对葡萄果实中糖酸积累的研究仅仅就单一品种或仅关注可溶性糖或有机酸之一进行研究,仍不够系统和全面。本研究针对葡萄果实整个发育时期对其糖酸积累进行相关研究。
5. 研究计划与进展
计划时间 | 预期进展 | 相关记录 |
2013年4月中下旬至5月初 | 前期材料准备,查阅文献,搜集实验方法等 | |
5月上旬至6月中旬 | 葡萄幼果期(果粒绿豆大小),采后及时处理,称量鲜、干重,测定可溶性固形物及有机酸含量,观测果核及胚解剖结构。 | |
6月中旬至7月中旬 | 果实转熟期采集,采后及时处理称量鲜、干重,测定可溶性固形物及有机酸含量,观测果核及胚解剖结构。 | |
8月下旬至9月下旬 | 整理数据,用Excel、SPSS等软件进行统计分析 |
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