王林苹果叶片高效离体再生体系的建立开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

苹果（malus pumila mill.）是世界四大水果之一，在我国栽培面积、产量和消费水平位居水果之首。近年来，为了进一步提高苹果的抗病性、抗虫性、抗逆性等，采用基因工程技术改良苹果的遗传特性，为苹果遗传育种提供了新技术，加快了苹果新品种的育种过程。但是在基因转化中，良好的再生体系是必不可少的，它是决定基因转化成败的关键。因此，建立高效、稳定的苹果离体再生体系十分重要。随着人们对苹果离体再生植株影响因素及其生理机制等的研究不断深入，目前，已经获得了澳洲青苹^[1]、乔纳金^[2]、富士^[3]、昌红^[4]、嘎拉^[5]、宫藤富士^[6]、新红星^[7]、长富6号^[8]、红将军^[9]、华富苹果^[10]、鲁加16号^[11]等高效离体再生体系。综合前人的研究结果，影响苹果离体再生的主要因子概括起来主要有：

1、基因型

许多研究表明，基因型是影响苹果离体再生的关键因素。不同品种需要不同的再生条件，也具有不同的再生率。主要表现在不同基因型外植体获得高效再生频率时需要的激素水平、分化所用的最短时间以及再生不定芽数差异显著。石保华^[12]等用帝国、自由、富士、嘎拉、金冠、乔纳金、jonasty等10个品种的试管苗，对其进行离体再生培养实验，发现再生能力的大小受到品种基因型的影响。

2. 研究的基本内容和问题

【研究目标】

通过进行激素配比对王林的离体再生影响的实验获得王林苹果品种的再生体系。

【研究内容】

3. 研究的方法与方案

【研究方法】

利用王林试管苗的叶片和叶柄进行接种与设置的再生培养基上，观察分析愈伤发生率和发芽率，对这些数据进行统计分析。

【实验方案】

4. 研究创新点

【特色或创新之处】

（1）王林苹果品种品种优良，适应性强，作为富士系品种的授粉品种，其再生体系未见报道。

（2）王林的高效离体再生体系的建立可应用于种苗快繁和脱毒苗的生产中，大大加快了其育种周期，也是进行基因转导的基础。

5. 研究计划与进展

2013.1~2013.4 扩繁王林试管苗

2013.4~2014.4 将增殖后的试材按试验方法进行诱导愈伤、出芽、增殖，建立高效稳定的王林再生体系