不结球白菜BcWRKY1转录因子互作蛋白筛选开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1、研究意义：

不结球白菜又称小白菜，原产中国，是长江中下游地区主要的蔬菜品种之一，在蔬菜周年供应上占据重要地位。霜霉病会引起白菜幼苗和成株叶片枯黄（李明远，2004），是导致不结球白菜生产中产量下降、品质变劣的三大病害之一（侯喜林，2003）。为了减轻病害的发生，长期施用农药不仅污染环境，破坏生态平衡，也严重威胁人们的身体健康。因此抗病性一直是不结球白菜最重要的育种目标之一。早在七五国家科技攻关期间就选育了多个不结球白菜抗病和感病高代自交系及商品种，但由于该病原菌为专性寄生菌，菌种不易保存，这对于开展霜霉病的抗性研究颇为不便。因而，尽管霜霉病抗性育种在生产中引起了强烈的重视，而且在抗性品种选育上也取得了大量成果，但有关其抗性机理的研究进展却较为缓慢。

wrky转录因子在调控防卫反应基因的表达、抗病信号转导以及植物抗病反应中发挥重要作用。研究表明，bcwrky1转录因子属于不结球白菜对霜霉病早期应答的基因，在不结球白菜抗霜霉病的信号转导中可能具有重要的作用。

2. 研究的基本内容和问题

1、研究目标：

利用酵母双杂交技术获得与bcwrky1互作的基因

2、主要内容：

3. 研究的方法与方案

1、研究方法：

从分子水平上对bcwrky1转录因子的互作蛋白进行了研究。本研究利用gateway技术，构建含bcwrky1全长cdna基因的诱饵载体，转化酵母菌株y187，再利用酵母双杂交技术，筛选获得了bcwrky1转录因子的互作蛋白。

2、技术路线：

4. 研究创新点

本项目特色是以现代分子生物学为手段，依据植物BcWRKY1转录因子在应答病害等生物胁迫中起着十分重要的调节作用这一科学事实，以不结球白菜霜霉病BcWRKY1转录因子为诱饵，利用酵母双杂交技术筛选互作蛋白。

5. 研究计划与进展

1、2014.3～2014.6bcwrky1全长cdna克隆；

2、2014.6～2014.11bd诱饵载体构建；

3、2014.11～2015.3酵母双杂交、互作蛋白筛选；