茶树精胺合成酶基因启动子的克隆与序列分析开题报告

 2022-01-28 21:49:44

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

本课题的意义、国内外研究概况、应用前景等(列出主要参考文献)精胺是多胺的一种,是生物体内生理循环中重要的调控物质,其中在细胞增殖过程中尤为重要。

在高等植物体内主要分为腐胺,亚精胺,精胺,尸胺,及腓精胺5种,多数研究表明其参与植物的生长发育,性别分化,果实成熟及衰老等多种生理过程的调节。

而对茶树精胺启动子的序列进行分析可以有效的定位基因的表达部位,对研究基因的表达过程和基因的表达作用具有重大意义。

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2. 研究的基本内容和问题

1. 目标本毕业论文拟通过茶树基因组dna为模板,设计引物克隆出茶树精胺合成酶基因的启动子序列,联合使用place和plantcare在线软件分析序列。

2. 内容本实验大致操作为将提取好的目标序列用pcr循环进行克隆增殖,其中包括pcr克隆,培养感受态细胞,将目的条带植入大肠杆菌增殖,对培养结果进行离心回收目的条带以及电泳检测克隆结果,完成序列克隆后将其送往南京金斯瑞生物公司进行测序及同源性比较。

测序结果用在线软件分析启动子基本元件。

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3. 研究的方法与方案

实验流程及可行性分析1 茶树基因组DNA的提取2 引物设计3 PCR循环增值4 PCR产物电泳跑胶检测产物5 用试剂盒回收目的条带6 感受态细胞转化目的条带至大肠杆菌7 提取质粒,测序8 序列分析,启动子元件的查找及分析可行性分析:上述步骤所需器材在本校实验室均具备,相关材料均可由生物公司购入,克隆产物交由金斯瑞生物公司测序,测定序列后使用在线软件进行分析,其中难点主要为克隆操作的准确性,但本校均可满足器材条件,理论依据也较为充分,故可行性较高。

4. 研究创新点

特色或创新之处精胺合成酶基因序列及其启动子序列的克隆与分析,能为进一步深入研究精胺合成酶基因的生物学功能和特性提供基础数据。

5. 研究计划与进展

研究计划及预期进展2014.92014.12进行目标序列的克隆2015.1将克隆完成的序列送往生物科技公司进行序列分析2015.22015.3对实验结果进行总结以及查阅相关资料准备撰写论文初稿2015.32015.4完成论文初稿2015.42015.5修改核实论文,定稿

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