1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
1. 研究意义1.1 糖对果实品质的影响 果实品质在很大程度上取决于糖的种类和含量,并直接影响了果实的营养价值、风味口感、色泽等品质性状。
糖在植物发育过程中还具有其他一些重要的生理功能,如为果实膨大提供渗透推动力等。
近些年来的研究还表明,糖也能作为信号传递的物质,糖信号与植物生长促进激素信号(如生长素)之间可能有潜在的联系,因此,糖分积累的过程是果实发育与品质形成的关键。
2. 研究的基本内容和问题
1. 研究目标 本研究以文献报道中不同果实中可溶性糖含量的不同为切入点,以模式植物拟南芥(tair:http://www.arabidopsis.org/index.jsp,)中糖代谢相关酶基因的cdna序列全长为探针,对葡萄和桃基因组数据库进行blast比对,获得与拟南芥序列同源性高的葡萄和桃糖代谢基因,并对这些基因进行表达分析与调控机理进行研究。
通过探究葡萄和桃果实发育期糖代谢途径相关酶编码基因的时空表达,找出其代谢途径中重要调控基因表达的发生与强弱,以及不同时间的表达水平,从而深入了解葡萄和桃果实发育过程中糖代谢机理,为如何调控果实糖代谢、提高葡萄和桃果实品质以及进一步开展相关研究提供理论依据。
随着分子生物学的日益发展,以及生物信息学的资源积累,从基因本质上研究植物生长代谢过程的机理成为现今研究的主流。
3. 研究的方法与方案
1. 研究方法:1)全基因组水平上糖代谢基因的多物种识别:利用全基因组数据库gdr(http://www.rosaceae.org/)和genoscope (http://www.genoscope.cns.fr/externe/genomebrowser/vitis/)上的数据和blast工具进行葡萄和桃的糖代谢途径基因进行预测和识别,探针来自拟南芥(tair, http://www.arabidopsis.org/index.jsp)数据库找出差异基因。
2)总rna的提取:葡萄和桃各组织总rna的提取采用ctab 法(张彦苹 等,2010)。
poly(a)。
4. 研究创新点
特色与创新之处(1)从全基因组和基因水平上对以往的结论进行证明。
(2)通过在基因水平上对糖代谢机理的研究进行进一步验证与分析,可以为深入分析酶的功能创造条件,提供相关支持和实验指导;(3)通过本项目的研究,可以提高参与者探索生命本质的积极性,并提高实际动手操作能力,掌握一系列相关实验方法及技巧,为日后的研究学习打下良好基础。
5. 研究计划与进展
研究计划及预期进展2014年3月初至3月下旬 前期准备,查找糖代谢相关酶基因,设计克隆基因引物;2014年4月中旬-8月 葡萄、桃果实采样;每次采样结束,立即回实验室提取rna,获得cdna;2014年8月-10月 定量rt-pcr检测葡萄、桃果实发育的不同时期、果实的不同部位的糖代谢代谢重要差异基因的表达。
2014年11月-2015年4月 ①继续或重复某些研究工作,并进行补遗。
②对成熟的研究结果撰写研究论文。
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