1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
内容包括:研究意义、国内外研究现状综述、项目创新之处、主要参考文献及出处: 1国内外研究现状及本研究意义葡萄是世界上栽培历史悠久,经济价值很高的果树,在果树中栽培面积居世界第一,葡萄品质的提高一直是葡萄生产和科学研究的重点。
在我国南方,葡萄果实发育和成熟期间高温多雨,光照相对不足,昼夜温差较小,时常出现果实着色不良的现象,严重影响了葡萄的品质(王涛等, 2010)。
葡萄产业对于我国农村经济发展以及丰富水果市场具有很重要的地位。
2. 研究的基本内容和问题
1 研究内容:本研究以葡萄品种藤稔为试材,具体研究内容如下:(1)藤稔葡萄发育过程中生理指标的测定葡萄果实生长发育具有s曲线的特点,分三个阶段即坐果期(生长Ⅰ期),转熟期(生长Ⅱ期),成熟期(生长Ⅲ期),根据前期的试验和前人的研究成果,我们对果实的发育分成7个时期,即花后25天、花后35天、 45天、55天、 65天、花后75、花后85天。
每次采样从植株的上、中、下3个部位的8-9个果穗上采摘大小均匀的果实,幼果期取50粒,膨大后每次采摘30粒,冰盒带回实验室,用锋利的刀片处理果实后,液氮速冻,贮于-70℃冰箱备用。
测定果实中aba、三种可溶性糖(蔗糖、葡萄糖、果糖)、果实硬度(鲜果)、酸度、可溶性固形物等生理指标。
3. 研究的方法与方案
1 总体试验方案与技术路线:以aba处理藤稔葡萄果实为基础,分析其对藤稔葡萄果实发育的生理及成熟相关的基因的影响,揭示aba调控藤稔葡萄果实成熟的分子机制。
(1)测定藤稔葡萄发育过程中各项生理指标藤稔葡萄果实发育成熟划分的七个时期,进行拍照后,处理测定果实中aba、三种可溶性糖(蔗糖、葡萄糖、果糖)、果实硬度、酸度、可溶性固形物等生理指标;(2)aba对果实发育进程的影响为分析aba对藤稔葡萄果实成熟进程的影响,利用不同浓度的aba对花后60天转色期的葡萄果实进行处理后,分析果实的生理参数:果实硬度、酸度、可溶性固形物、糖和aba。
利用ms温育试验体系分析aba和糖对葡萄果实成熟相关基因的影响。
4. 研究创新点
本项目以藤稔葡萄果实为研究对象,进一步揭示葡萄果实中aba参与果实发育的生物学通路及其分子调控机制。
利用aba外源喷施葡萄转色前期的果实能促进果实的上色,通过aba处理对葡萄生理和分子指标的测定,分析葡萄果实的发育成熟机理,为以后aba协同调控的基因及调控葡萄果实发育成熟进程的信号网络的构建奠定基础。
同时为有效利用重要基因调控果实发育提供科学依据。
5. 研究计划与进展
1.2014.5-2014.10:((1) 开展实验的准备工作,主要是所需试剂盒、易耗品的购置,实验材料的采集;((2) 藤稔葡萄果实各个发育时期果实的取样,测定藤稔葡萄果实发育过程 中 中糖、酸、可溶性固形物、ABA含量等的生理指标变化。
(3) ABA外源喷施处理对藤稔葡萄果实,分析成熟相关的生理指标;22014.10-2015.5: (1) 提取藤稔葡萄果实各个时期总RNA进行反转录;(2) 利用Northern blot和荧光定量分析成熟相关基因在藤稔葡萄果实发育过过程中的变化;(3) 综合分析ABA在葡萄果实发育中的分子调控机理;(4) 全面总结实验结果,撰写研究论文、总结项目研究工作,准备上报验收材料以及提交研究成果。
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