基于Gateway技术构建不结球白菜ERF70过量表达载体开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

一、本课题的意义：

本课题的研究意义在于掌握gateway表达载体构建技术，学习基因克隆的基本方法；获得bcerf70过量表达载体构建技术，验证bcerf70基因功能。

二、国内外研究概况：

2. 研究的基本内容和问题

一、研究目标：

获得bcerf70过量表达载体构建技术，验证bcerf70基因功能

二、研究内容：

3. 研究的方法与方案

一、研究方法：

1、vc含量的测定：

高效液相色谱法测定维生素c含量

4. 研究创新点

本研究的特色在于：

1、利用了一项新的基因克隆及载体构建的方法；在文库构建方面，gateway技术避免了传统cdna文库构建中cdna内切酶位点易被切断、非cdna片段易插入而导致的cdna完整性低、无效克隆数量多等问题。利用这种构建载体的方法，提高了阳性克隆率，使基因克隆更快速，灵活。

2、本研究通过构建erf70的过量表达载体，测定其表达载体的量及植物内vc的含量，从而确定erf70的表达与vc含量的关系；及在逆境下，erf70的表达量。

5. 研究计划与进展

1、相关文献的查阅，向老师，师兄请教相关问题；实验材料的准备；2014.09-2014.10

2、制备含有相关目的基因的质粒，制备表达载体pearlergate103，转化大肠杆菌；2014.10-2015.1

3、整理数据，分析结果，撰写论文；2015.1-2015.2