不同种类浓度的生长调节剂对三种柿属植物组培苗生根的影响开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

柿树通常为高7-9米的落叶乔木。

传统上主要采用油柿、野柿等优良砧木进行嫁接繁殖。

但常规繁育方法周期长，成活率低，嫁接良种树形大、结果较晚、为管理带来不便。

2. 研究的基本内容和问题

研究目标： 通过对不同培养基及植物生长调节剂的筛选，初步建立小方柿的组织培养体系及植株再生体系，形成小方柿快速繁殖育苗的新途径,为基因工程研究做准备。

研究内容： 1）小方柿休眠芽初代培养 2）小方柿组培苗继代增殖培养3）小方柿组培苗叶片再生 4）小方柿组培苗生根拟解决的关键问题 柿树含酚类物质较多，在离体繁殖过程中外植体极易褐变死亡，建立完整的组培快繁体系较困难。

本实验可克服外植体褐变、玻璃化、生根难现象等问题。

3. 研究的方法与方案

技术路线： 1）准备实验材料；2）初代培养基的筛选；3）继代培养基的筛选；4）叶片及茎段再生的研究；5）生根培养基的筛选；6）移栽实验方案：一.小方柿休眠芽初代培养 以1年生南通小方柿枝条上的休眠芽为试材，使用10双氧水对小方柿的休眠芽进行消毒20min。

将灭菌后的休眠芽，在无菌条件下剥去外部鳞片和外层3片叶原基后，切下顶端3mm左右的幼芽，接种到含有不同生长素和细胞分裂素的培养基中，观察生长情况。

二.小方柿组培苗继代增殖培养 将组培苗接种到含有不同浓度的zt、iaa、ga3的ms、1/2ms、 (1/2n)ms培养基中生长2代后，统计组培苗的生长情况，比较赤霉素在组三.小方柿叶片再生 将小方柿组培苗顶端第2-3片展开叶切成4mmx4mm大小的叶片，叶片正面贴近培养基并平铺，对影响叶片再生分化的基本培养基、tdz、naa以及暗培养数天后进行选择优化，一个月后将形成的愈伤转入ms(1/2) zt2.0mg/l iaa0.1mg/l,观察叶片愈伤形成及分化情况。

4. 研究创新点

初步建立南通小方柿的组培快繁体系，小方柿休眠芽用75酒精消毒30s，10双氧水浸泡20min进行接种前消毒处理的方法能有效解决小方柿初代褐化严重、成活率低的问题。

使用（1/2N)MS ZT1.0mg/L IAA0.05mg/L GA30.05mg/L PVP500mg/L和（1/2N)MS ZT1.0mg/L IAA0.05mg/L PVP500mg/L培养基交替培养，增值率能明显升高，有效解决南通小方柿不能增殖扩繁的问题。

5. 研究计划与进展

第一阶段：2015.04---2015.05收集得相关文献，掌握植物组织培养技术和再生体系相关知识。

准备好实验所需器具及材料等。

第二阶段：2015.092016.02 小方柿休眠芽初代培养：筛选出最适小方柿初代培养基。