1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
课题的意义、国内外研究概况、应用前景等(列出主要参考文献)气孔是植物与外界环境之间进行气体和水分交换的主要通道。
光合作用所需要的co2、水光解释放的o2以及蒸腾作用散发的水汽,主要经由气孔通道,其开度大小与植物生命活动的多种代谢过程有着密切关系。
多种因素可参与调节植物气孔开度,越来越多的实验结果表明,ros作为第二信使广泛地参与了各种刺激因素诱导的气孔运动,表明活性氧产生是气孔运动的信号转导过程中重要的环节之一。
2. 研究的基本内容和问题
研究的目标本实验目的在于探究5-ala调节气孔运动过程中黄酮醇是否参与其中,在微小的保卫细胞模型中探究5-ala与黄酮类物质代谢关系及其与5-ala调节气孔运动的关系。
研究内容1.不同外源5-ala预处理诱导保卫细胞内黄酮醇积累效应。
2.外源黄酮醇预处理抑制aba诱导的气孔关闭。
3. 研究的方法与方案
研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析研究方法1.利用不同浓度外源5-ala(0、0.5、5、10 mgl-1)预处理(2和4h),使用黄酮醇荧光染料dpba染色测定保卫细胞内黄酮醇含量。
2.外源黄酮醇(10μmoll-1)预处理1h,使用aba处理后测定观气孔开度大小 技术路线实验方案及可行性分析1、将苹果叶片离体悬浮培养于mes-kcl缓冲液中,置于在光照培养箱内。
2 h后,转移到添有0、0.5、5、10 mg l-1 5-ala的mes-kcl溶液中,再哺育2 h或4 h,取出叶片,制备下表皮条,参照lee等(2014)介绍的方法用黄酮醇荧光染料dpba染色,然后在激光共聚焦显微镜下观察荧光强度,并推算其相对含量及变化。
4. 研究创新点
特色或创新之处利用5-ALA预处理及黄酮醇荧光染料DPBA探究了保卫细胞内5-ALA调节苯丙烷代谢效应,使用外源黄酮醇处理探究其参与气孔调节效应。
认为黄酮醇参与5-ALA调节的气孔运动过程。
5. 研究计划与进展
研究计划及预期进展2015年4月-2015年8月,文献查找、开题报告的撰写及试验方案的设计2015年8月-2016年3月,实验材料的准备,实验室实验的开始,筛选适宜5-ala浓度,学习激光共聚焦使用,测定dpba荧光强度。
2016年3初月-2016年4中旬,外源黄酮醇预处理,测定其抑制aba诱导气孔关闭效应。
2016年4月中旬---2016年6月,实验数据处理,撰写毕业论文及修改,准备毕业答辩。
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