1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
1．项目的立项依据
果实的成熟是果实生长发育的一个阶段，也是一个复杂的发育调控过程，其间经历了一系列生理生化的变化，包括乙烯的生物合成、细胞壁的修饰、淀粉向糖的转化、色素的合成、芳香物质的积累和多酚类物质及抗氧化系统的变化等（ziosi et al.，2003），这些过程不仅受到如基因表达、生长发育阶段和激素调控等因素的调控，还受到果实采后处理方法、贮藏条件和时间等的调节，直接影响果品商品性和市场竞争力。植物激素乙烯是调节果实成熟衰老及品质变化的关键因子，乙烯相关研究一直都是果实成熟衰老研究的热点与主轴。
1.1果实成熟与呼吸代谢
2. 研究的基本内容和问题
2.1项目的研究内容
（1）几种跃变型与非跃变型果树果实发育过程中乙烯含量的测定
（2）筛选不同类型果树果实在乙烯合成和信号转导过程中的关键基因
3. 研究的方法与方案
3.1 拟采取的研究方案
（1）实验材料的选择与处理
本项目采用的材料为已完成全基因组测序的葡萄。
4. 研究创新点
利用qRT-PCR技术并结合生物信息学分析的方法对葡萄果实进行检测，构建了完整的乙烯合成与信号转导基因网络。
通过转基因等方法对其功能进行研究，明确乙烯在葡萄发育中的作用，为解释果实衰老机理奠定系统的依据。
5. 研究计划与进展
2016年1月至4月 (1) 实验开展的准备工作，主要是购买所需试剂盒、易耗品以及植物实验材料的采样与处理等。 (2)利用气相色谱仪对不同发育阶段果实对其内源乙烯释放量进行测定，并利用定量PCR技术检测其乙烯合成与信号转导网络中的基因以及乙烯处理对乙烯合成与信号转导网络中的基因表达水平的影响。在生理水平上和分子水平上共同研究跃变型与非跃变型果树果实的成熟衰老机制，完善果实成熟中的基因调控网络。 (3)利用转录组测序技术，研究不同发育阶段对外源乙烯产生响应的基因以及在果实发育重要时期高丰度或低丰度表达的基因。 (4)利用qRT-PCR对筛选出的基因进行检测。 (5)将筛选出的基因通通过农杆菌介导转化番茄，深入分析这些关键基因。 2016年4月下旬： (1)在分析总结上一阶段研究工作的基础之上，继续或重复某些研究工作，并进行补遗。 (2)对成熟的研究结果撰写研究论文。 (3)完成项目设计的工作任务，总结本项目的研究工作，准备上报验收材料及提交研究成果。 |
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