‘阳光玫瑰’葡萄无菌体系的建立及茎尖培养研究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

课题意义：阳光玫瑰(shine muscat) 葡萄是近年来从日本引进的一种欧美杂交新葡萄品种, 在我国葡萄产业中极具发展潜力, 目前仅在广西阳光玫瑰 葡萄栽培面积就已近67hm2, 一年两收栽培模式下667m2 产可达1500kg 左右, 市售价在15 元/kg以上, 对促进果农增收意义重大.。

但是, 目前的阳光玫瑰 葡萄在栽培中,普遍表现叶片皱褶、畸形、着色不均匀等类似病毒病的症状，并且严重影响了果实的产量。

本课题着手阳光玫瑰葡萄的脱毒苗研究，利用茎尖培养的方式大量扩繁无毒苗，建立阳光玫瑰葡萄脱毒苗培育体系，实现脱毒苗规模化、工厂化生产。

2. 研究的基本内容和问题

研究的目标与内容 本课题为研究阳光玫瑰葡萄的茎尖培养脱毒体系，从外植体截取时间、截取部位、外植体处理、外植体消毒试剂选择、外植体消毒时间、初代培养基筛选、继代培养基筛选、生根培养基筛选等多个方面研究，进行多组实验对比，根据直观判定、数据差异等来确立最优体系选择，以期该体系能复制并大量推广，并最终应用到实际生产中。

拟解决的关键问题 完成阳光玫瑰葡萄初代培养基筛选、继代培养基筛选、生根培养基筛选，并添加不同浓度的植物生长调节剂，确立最适培养基 最适浓度植物激素浓度配比。

3. 研究的方法与方案

研究方法 基于阳光玫瑰葡萄的市场调查、果园实地考察，根据已有的大量文献资料，结合自己的理论思想，加上导师的宏观方向指导，综合利用本实验的资料，建立起阳光玫瑰葡萄的茎尖培养脱毒苗培育的一整套体系，并最终应用到实际生产中。

技术路线实验方案(1) 对照设计实验在南京农业大学果树分子研究室里进行，阳光玫瑰葡萄外植体消毒时间分为5s、15s、25s三个梯度对比；初代培养基为ms培养基 0.02mg/l iba 1.0mg/l 6-ba、ms培养基 0.02mg/l iba 1.5mg/l 6-ba、ms培养基 0.02mg/l iba 2.0mg/l 6-ba三个梯度对比；继代培养基为1/ 2 ms培养基 1. 0 mg/ l6-ba 0. 03 mg/ liba ga 0. 2 mg/ l、3/4 ms培养基 1. 0 mg/ l6-ba 0. 03 mg/ liba ga 0. 2 mg/ l、3/ms培养基 1. 0 mg/ l6-ba 0. 03 mg/ liba ga 0. 2 mg/ l三个梯度对比；生根培养基为1/ 2 ms培养基 1.0mg/l 6-ba、1/ 2 ms培养基 1.5mg/l 6-ba、1/ 2 ms培养基 2.0mg/l 6-ba三个梯度对比。

(2) 数据获取统计消毒后外植体正常生长的数量，获得消毒处理的最佳时间；利用照片记录，直尺测定初代培养、继代培养移植15天后的生长高度差；照片记录，直尺测定生根培养移植15天后的生长高度差，以及根长。

4. 研究创新点

研究思路富有特色：本课题基于阳光玫瑰葡萄外植体不同消毒时间、不同培养基及不同激素浓度配比，进行差异性对比，建立起一整套脱毒苗培育体系。

研究手段可靠：本课题将根据实验数据，筛选出最优脱毒苗培育体系。

研究内容系统深入：本课题不仅深入研究了阳光玫瑰葡萄脱毒苗培育体系的各个环节，还对该体系的实用性与拓展性了研究，项目总体上有较好的深度和广度，以及层次性和系统性。

5. 研究计划与进展

2016年6月至7月中旬搜集并阅读相关文献，撰写一篇文献综述， 2016年7月中旬至7月底在南京汤山陶建敏老师截取阳光玫瑰葡萄外植体；2016年8月初至2017年3月底进行室内组培试验，并对试验的数据进行处理分析；2016年12月初申请课题；2017年2月中旬撰写开题报告；2017年3月中旬进行中期检查；2017年3月底至4月根据实验结果撰写毕业论文；2017年5月准备论文答辩。