转RDREB1BI基因的草莓抗寒性和果实品质的鉴定开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

草莓(fragaria chiloensis.duch.bail.)是蔷薇科草莓属多年生草本植物，又叫洋梅。原产于南美洲。草莓品种繁多，有2000多个品种，果实鲜红美艳，柔多汁，甘酸宜人，芳香馥郁，营养丰富，有水果皇后的美誉。草莓果实的营养物质易被人体吸收，是保健果品，具有很高的药用和医疗价值。据《本草纲目》记载，草莓汁具有消炎、解热、止痛、润肺生津、健脾、解酒、促进伤口愈合等功效。现代医学已证明，草莓具有抗衰老延年益寿的作用。草莓还具有适应性强、试栽区域广、株体小、生长周期短、浆果成熟期早、连续采收期长、繁殖容易、管理方便等特点。

草莓安全越冬和耐寒品种的缺乏成为生产上的突出问题。虽然传统育种取得了较大成功，但由于草莓的栽培品种多为八倍体，遗传性状高度杂合，给常规杂交育种带来很大困难，通常需10-30年时间进行回交才能逃逸某些不良性状，获得所需的目的优良性状品种。因此，只靠传统育种方法难以满足草莓生产发展的需要。近年来，由于转基因技术在作物品种改良中的广泛应用，特别是抗寒基因在提高作物抗寒性方面的研究取得了成功，为草莓抗寒育种开辟了一条新途径。

草莓的遗传转化研究始于1990年，迄今，已将多种有经济价值的外源目的基因导入草莓，其中以抗性基因居多^[1]。1999年，firsov和dolgov^[2]农杆菌介导法将afp基因导入草莓，获得了转基因草莓植株，但未见有关其农艺性状方面的研究报道。随后，owens等^[3、4]从草莓和酸樱桃中克隆出与拟南芥同源性很高的冷诱导转录影响因子cbfl基因，将其置于35s启动子的调控之下，通过农杆菌介导法导入草莓honeoye,获得两株转化植株。检测表明，该基因在转化植株的叶片和花托中仅有较低水平的表达量，但转化株系叶片的相对电导率在温度降低至－8.2℃和－10.3℃时，仍没有明显变化；而未转化的野生型株系在－6.4℃己有了很大改变，表明转基因植株的抗寒能力增强。此外khammuang等^[5]也获得了转afp基因的草莓植株。脱水素是植物体内的一种lea蛋白，能够在逆境下大量表达。mario等[6]则将来源于小麦的酸性脱水素基(wcor410)导入草莓中，获得的转基因草莓叶片的抗寒性比未转基因的提高了5℃。

2. 研究的基本内容和问题

研究目标

本项目拟通过红颊草莓非转基因苗与转基因受体生理生化指标及果实营养成分的比较，鉴定转rdreb1bi基因草莓品种红颊的植株生长势、果实品质等生物学特性与非转基因植株的差异及目的基因表达情况。

研究内容

3. 研究的方法与方案

研究方法

以未进行基因转化的植株作为对照，与经过分子检测的转化rdreb1bi基因的草莓品种红颊盆栽苗低温逆境处理并完成生理指标的测定比较；逆境处理及恢复实验后，观察其表型差异，测定经过处理后转基因株系外源基因表达情况。对果实品质进行测定。

技术路线

4. 研究创新点

创新之处

（1）转化rdreb1bi基因的草莓红颊还报道较少。

（2）有望培育具综合抗性草莓新品种。

5. 研究计划与进展

项目研究计划及预期进展

①2015年3月～2015年6月 详细制备试验方案，准备试验测定的药品和试剂，并进行转rdreb1bi基因草莓及普通苗的扩繁和炼苗。

②2015年7月至2015年12月 观测花期特性并测定试验中所有的相关指标。