1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
(1)研究意义生长素是植物生长发育过程中极为重要的植物激素,生长素是能引起植物细胞的增长,尤其能刺激茎内细胞纵向生长并抑制根内细胞横向生长的一类激素。
在果实形成和发育的过程中,生长素还能诱导无籽果实的产生(单性结实),如无籽番茄和无籽辣椒。
乙烯是一种气体植物激素,在植物种子萌发,细胞伸长,细胞的分化,性别决定,果实成熟,衰老和脱落等重要的生命过程中都发挥着重要作用。
2. 研究的基本内容和问题
(1)研究目标通过对转基因番茄果实发育的观察和gus染色分析,花蕾与果实eil1浓度和生长素浓度的定量测定,了解乙烯和生长素在番茄果实发育过程中的变化规律,进而确定两者在果实发育中是否存在某种关联。
(2)研究内容(1)研究eil1蛋白在番茄花发育过程的中的时空表达特征;(2)研究eil1蛋白质对生长素代谢的影响,揭示乙烯和生长素在果实形成过程中的互作关系。
(3)拟解决的关键问题通过对番茄花蕾不同时期的gus染色分析,探究在番茄果实发育过程中内源乙烯的增加或减少是否会引起生长素含量的变化。
3. 研究的方法与方案
(1)研究方法利用gus基因的组织化学定位法对eil转基因番茄果实发育前期(开花前)花蕾进行染色,通过对eil基因和生长素表达的时间、部位和程度的分析,探究两者在开花前的相互关系。
通过对开花后至成熟的不同时期的果实中eil1的荧光定量pcr和生长素的定量分析来探究两者在该时期的相互关系。
(2)技术路线 (1)利用转基因技术构建eil-ox转基因番茄与dr5-gus转基因番茄(2)利用eil-ox转基因番茄与dr5-gus转基因番茄杂交获得eil-ox/dr5-gus转基因番茄种子。
4. 研究创新点
目前乙烯与生长素的互作研究多集中在果实成熟阶段、植物种子萌发、叶片形态及根细胞的发育上,而两者在番茄果实发育过程特别是果实发育前期中的互作关系的研究则鲜有报道,因此欲设计实验来探究两者在果实发育过程中的互作关系,探究两者在番茄果实发育过程中的相互关系。
5. 研究计划与进展
(1)研究计划 1.2016年9月中旬进行番茄播种2.2016年10月中旬左右开花期进行采样和gus染色观察。
3.2106年11月初将染色好的样品制成石蜡切片。
(2)预期进展1.2016年10月中旬进入花期前后乙烯超表达番茄植株叶片开始出现应答反应,叶片表现为向地生长。
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