菊花CmBHLH161基因的功能分析开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

菊花是我国十大传统名花和世界四大切花之一，具有观赏、食用及药用等多种价值，在花卉产业中占有重要地位。

全世界约有菊花品种30000个，其变异类型之丰富被誉为园艺育种史上的奇迹。

菊花瓣型多样，可分为平瓣、匙瓣、管瓣、桂瓣、畸瓣等，是菊花中变化最为丰富、最能体现其观赏价值的重要性状之一。

2. 研究的基本内容和问题

1、研究目标（1）初步探明cmbhlh161基因在菊花花发育过程中发挥作用的分子机制（2）为深入地研究菊花花发育分子机制奠定基础，为菊花新品种培育提供理论依据。

2、研究内容本研究以切花大菊神马为研究材料（1）明确cmbhlh161蛋白在细胞中的位置（2）通过实验筛选出cmbhlh161的互作蛋白，初步明确其功能特性。

3、拟解决的关键问题（1）克隆基因（2）进行载体构建（3）明确cmbhlh161蛋白在细胞中发挥功能的位置（4）筛选出cmbhlh161的互作蛋白

3. 研究的方法与方案

1、拟采取的研究方法（1）基因克隆：转录组测序（2）载体构建：利用绿色荧光蛋白构建融合蛋白载体（3）明确cmbhlh161在细胞中的位置：亚细胞定位实验（4）筛选cmbhlh161的互作蛋白：酵母双杂交实验2、技术路线3、实验方案（1）亚细胞定位第一天，准备高渗培养基（蔗糖7.5g，琼脂2.5g，山梨醇18.2g，ms粉1.1g）和ms培养基并买好洋葱，买好洋葱洋葱。

在晚上19:00到21:00间切洋葱，放置于高渗培养基上，充分接触培养基，培养过夜，摇菌并提取质粒。

第二天，领金粉，带1.5ml试管，剥洋葱表皮，平铺于ms培养基上，正中间放一块较大的，四周补齐。

4. 研究创新点

特色或创新之处菊花是研究花瓣发育的理想材料，但是目前国内外针对菊花花发育的研究较少，特别是关于花瓣发育的报道更为鲜见。

cmbhlh161基因属于非典型的bhlh转录因子或称hlh转录因子，目前关于该类转录因子的研究并不是很多。

菊花cmbhlh161基因与拟南芥pre4基因亲缘关系较近，关于拟南芥pre家族的报道已有一些。

5. 研究计划与进展

研究计划及预期进展1、研究计划（1）2016.05-2016.07 文献查找与阅读，完成基因的克隆与载体的构建（2）2016.08-2017.01 基因的亚细胞定位与酵母双杂交筛选互作蛋白 （3）2017.02-2017.05 论文撰写及答辩2、预期进展（1）完成基因克隆与载体构建的准备工作（2）通过亚细胞定位明确CmBHLH161在细胞中发挥功能的位置（3）通过酵母双杂交实验筛选出该基因的互作蛋白，初步明确其功能特性