1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
课题的意义:植物的气孔主要位于叶片表面,是植物与外界环境之间进行气体交换的主要门户。
气孔在碳同化、呼吸、蒸腾作用等气体代谢中,成为空气和水蒸气的通路,其通过量是由保卫细胞的开闭作用来调节,在生理上具有重要的意义,气孔是依据光合作用同化的co2量和蒸腾失水量来调控气孔的开闭。
5-氨基乙酰丙酸(ala)能够显著促进多种植物的光合作用,经研究发现ala可以促进气孔开放抑制、气孔关闭。
2. 研究的基本内容和问题
研究的目标: 本实验以拟南芥为试验材料,研究不同处理下的气孔开度时间变化,同时测量叶片中ala含量。
通过观察la对aba、h2o2和ca2 诱导的气孔关闭的抑制作用的动态变化,分析ala抑制气孔关闭的作用是ala自身作用或是ala的代谢物的作用,为进一步揭示ala调节气孔运动的机制奠定基础。
内容: 研究不同处理下的拟南芥子叶气孔开度随时间的动态变化,分别设四组实验:(1)研究la对aba诱导气孔关闭的影响(2)研究la对h2o2诱导气孔关闭的影响(3)研究la对cacl2诱导气孔关闭的影响(4)同时测量la处理后叶片中ala含量随时间的动态变化。
3. 研究的方法与方案
研究方法、技术路线、实验方案:一、种子处理:(1) 选取籽粒饱满大小一致的拟南芥种子装于1.5 ml ep 管中;(2) 加入1 ml无菌水,上下颠倒混匀; (3) 弃无菌水,加入1 ml75%乙醇,上下颠倒混匀约45s左右;(4) 弃75%乙醇,加入1 ml无菌水,上下颠倒混匀;(5) 重复操作步骤 (4),共3次;(6) 弃无菌水,加入1 ml 10% naclo,上下颠倒混匀,约10 min;(7) 弃naclo,加入1 ml无菌水,上下颠倒混匀;(8) 重复操作步骤(7),共3次。
二、营养液配置及倒平板:(1)ms培养基配置取ms粉2.37 g、蔗糖15 g、琼脂4 g和水500 ml倒入烧杯中,搅拌均匀后加入naoh溶液,用精密试纸(ph5-6)检测,调控培养液的ph调至5.8~6.0。
倒入锥形瓶中用两层封膜封口,将其放入灭菌锅中121℃ 灭菌20 min左右。
4. 研究创新点
试图用实验数据证明,ALA抑制气孔关闭过程中起作用的物质到底是ALA本身还是ALA的代谢物质。
5. 研究计划与进展
第一阶段:准备阶段16年9月15日-16年9月18日:查阅ABA、ALA对气孔开度影响相关资料,掌握研究气孔开毒的相关研究方法,做好开题报告的工作;16年9月20日-16年9月28日:资料总结整理,翻译英文资料、写专业文献综述;第二阶段:观察学习阶段;16年10月1日-16年10月20日:进行拟南芥种子栽培实验,了解拟南芥理特性,对拟南芥的生物学特性和生长发育规律进行观测;第三阶段:实验研究阶段16年10月21日-16年11月20日:设计并进行实验16年12月1日-17年1月10日: 整理实验结果并形成论文进展与预期一致。
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