1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
大蒜(allium sativum l.)又名蒜,葫蒜,是百合科葱属二年生草本植物,原产于亚洲西部高原地区,是世界广泛栽培的一种食药兼用蔬菜。大蒜营养丰富,含有糖类、蛋白质、脂肪、粗纤维、微量元素、维生素、蒜氨酸、大蒜辣素等多种成分。此外,大蒜含有人体中几乎所有的必需氨基酸,其中半肤氨酸、组氨酸和赖氨酸的含量较高。大蒜营养丰富,其幼苗、花茎和鳞茎均可食用。大蒜还具有很高的药用价值,有杀菌、消毒、降血压等功能,被认为是最佳保健食品之一,常食之具有祛湿抗毒、健脾强身的功效[1]。同时大蒜可作为出口蔬菜进行加工处理,增加外汇[2]。我国是世界上大蒜生产、消费和出口大国,大蒜产品出口量占蔬菜总出口量的30%左右。国际市场占有率超过50%,大蒜主销于欧洲和东南亚,国际上的市场占有率高达50%。[3]
大蒜在长期靠鳞茎无性繁殖过程中,大量的病毒累积导致种性下降。利用组织培养可以为大蒜脱毒,提高品质。但是玻璃化作为组织培养三大问题之一,一直阻碍组培的发展。试管苗的玻璃化是植物组织培养中非常普遍的现象,在草本和木本植物的组织培养中都已相继报道。
目前,关于试管苗玻璃化现象的研究较为广泛,主要通过对玻璃化苗的形态解剖学和植物生理学方面的研究,来探讨试管苗玻璃化发生的可能机理。debergh[4]等认为培养基的水势影响玻璃苗的形成,并且,其中起作用的只是衬质势,渗透势对玻璃苗并不影响。但杨俊英等[5]认为玻璃化苗外部形态解剖结构畸形和内部生理生化特点发生异常变化导致玻璃苗新陈代谢和生理功能失调,是试管苗发生玻璃化的重要原因。杨芸等通过不同浓度的h2o2和不同浓度的活性氧抑制剂处理得出大蒜的玻璃化和植株体内的活性氧化系统有关。[6]梁海曼和周菊华[7]通过对试管苗玻璃化文献的研究得出不同的植物玻璃化的原因不同,但都是在人工培养条件下所造成的,培养基中的添加物,外界的环境均能引起玻璃化现象的产生。james[8]曾提出一种假设,玻璃化可能与外源细胞分裂素(ck)代谢过程中某些中间产物的积累有关。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标:
1. 明确外源脱落酸抑制大蒜玻璃化的作用效果。
2. 揭示脱落酸处理大蒜时其体内抗氧化酶的变化规律。
3. 研究的方法与方案
研究方法:
本试验拟采用大蒜蒜薹花序轴培养进行处理,测定不同处理之后大蒜玻璃化率以期获得最佳脱落酸浓度,测定该浓度下抗氧化物酶活性(pod、sod、cat、apx、gr)以及可溶性蛋白含量随时间的变化,以揭示外源aba抑制大蒜试管苗玻璃化的内在机理,玻璃化的控制提供理论依据。
技术路线:见附件
4. 研究创新点
1.关于从激素方面研究试管苗玻璃化的报道多以细胞分裂素为主,而从脱落酸抑制试管苗玻璃化的研究并不常见。本实验欲采用脱落酸处理玻璃化试管苗,研究其抑制效果。
2.本试验旨在明确脱落酸抑制试管苗的作用效果并揭示其生理基础。
5. 研究计划与进展
(1)研究计划:
第一阶段:2016.04-2016.04查阅相关资料为实验准备理论依据,学习组织培养以及相关指标测定的方法及实验操作,进行实验器材、药品准备。
第二阶段:2016.042016.08进行试验。
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