LDOX酶对碧桃间色形成的影响开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1.本课题的意义桃（amygdalus persica linn.）是蔷薇科李属植物，原产于我国，已有三千多年种植历史。

果可食用，花可观赏。

桃有品种繁多，国内外有许多观赏桃品种，碧桃是其中的一个重要观赏品种。

2. 研究的基本内容和问题

1.研究目标：确定碧桃间色花花瓣中的色素组成，测定在碧桃花发育不同时期的ldox酶活性的变化以及ldox基因的表达差异。

2.研究内容：（1）利用特征显色反应、紫外-可见光法和ph示差法分析洒红桃红色花和间色花色花瓣所含花色素种类及含量；（2）利用hplc测定ldox酶活性在洒红桃花发育不同阶段的变化；（3）利用qrt-pcr研究洒红桃花发育不同时期的ldox基因表达情况。

3.拟解决的问题：本实验拟通过显色反应确定碧桃花瓣色素种类，再通过紫外-可见光法和ph示差法确定色素含量；通过hplc测定洒红桃花不同发育时期ldox酶活性；利用qrt-pcr测定ldox的基因表达差异；最后得出ldox对碧桃间色形成的影响。

3. 研究的方法与方案

1.研究方法采用碧桃品种洒金桃红色和间色花作为材料，用特征显色反应、紫外-可见光法和ph示差法分析红色和间色花花瓣所含色素种类及含量；利用hplc测定ldox酶活性在花发育不同阶段的变化；利用qrt-pcr研究洒红桃花发育不同时期的ldox基因表达情况。

2.技术路线3.实验方案（1）利用特征显色反应确定洒红桃红色和间色花花瓣中的色素种类；（2）利用紫外-可见光法和ph示差法测定相关色素含量；（3）提取ldox酶，并测定其酶活性；（5）利用改良ctab法提取碧桃花瓣总rna，并合成cdna；（6）挑选出ldox基因，并获取其cds序列，合成相关引物；（7）利用rt-pcr进行检测，并使用7300 system软件对数据进行分析，基因的相对表达水平采用2-△ct△ct方法计算。

每组cdna重复三次。

4. 研究创新点

碧桃花朵大，色彩鲜艳且丰富，具有很高观赏价值。

目前国内对碧桃的研究主要在整形修剪、叶片等方面，少有关于碧桃花色素合成的研究。

ldox是花青素合成途径中无色花青素形成有色花青素最为重要的酶。

5. 研究计划与进展

（1）2016.4-2016.6 阅读文献，设计实验方案（2）2016.6-2017.1 进行各项试验，并收集、处理各项数据及图表（3）2017.1-2017.5 进行论文撰写