脱落酸合成相关基因在巨峰葡萄果实发育过程中的表达分析开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1.项目立项依据葡萄是世界上栽培历史悠久，经济价值很高的果树，在果树中栽培面积居世界第一，葡萄品质的提高一直是葡萄生产和科学研究的重点。

在我国南方，葡萄果实发育和成熟期间高温多雨，光照相对不足，昼夜温差较小，时常出现果实着色不良的现象，严重影响了葡萄的品质（房经贵等，2009）。

葡萄产业对于我国农村经济发展以及丰富水果市场具有很重要的地位。

2. 研究的基本内容和问题

2.1 研究内容：本研究以葡萄品种藤稔为试材，具体研究内容如下：（1）藤稔葡萄发育过程中生理指标的测定葡萄果实生长发育具有s曲线的特点，分三个阶段即坐果期（生长Ⅰ期stageⅠ），转熟期（生长Ⅱ期stageⅡ），成熟期（生长Ⅲ期stage Ⅲ），根据前期的试验和前人的研究成果，我们对果实的发育分成7个时期，即坐果期的花后25天、花后35天，转熟期的花后45天、55天、 65天，成熟期的花后75、花后85天。

每次采样从植株的上、中、下3个部位的8-9个果穗上采摘大小均匀的果实，幼果期取50粒，膨大后每次采摘30粒，冰盒带回实验室，用锋利的刀片处理果实后，液氮速冻，贮于-70℃冰箱备用。

测定果实中aba、三种可溶性糖蔗糖、葡萄糖、果糖、果实硬度（鲜果）、酸度、可溶性固形物等生理指标。

3. 研究的方法与方案

3.1 研究方案：总体试验方案与技术路线：以aba和糖处理藤稔葡萄果实为基础，分析其对藤稔葡萄果实发育的生理及成熟相关的基因的影响，揭示aba和糖调控藤稔葡萄果实成熟的分子机制。

（1）测定藤稔葡萄发育过程中各项生理指标藤稔葡萄果实发育成熟划分的七个时期，进行拍照后，处理测定果实中aba、三种可溶性糖蔗糖、葡萄糖、果糖、果实硬度、酸度、可溶性固形物等生理指标；（2）aba和糖对果实发育进程的影响为分析aba和糖对藤稔葡萄果实成熟进程的影响，利用不同浓度的aba和糖对花后60天转色期的葡萄果实进行处理后，分析果实的生理参数：果实硬度、酸度、可溶性固形物、糖和aba。

利用ms温育试验体系分析aba和糖对葡萄果实成熟相关基因的影响。

4. 研究创新点

4本项目的特色与创新之处（1）我们前期的研究揭示了aba和蔗糖可协调调控草莓果实的发育成熟进程。

本项目以藤稔葡萄果实为研究对象，进一步揭示葡萄果实中蔗糖和aba参与果实发育的生物学通路及其分子调控机制。

通过蔗糖和aba处理对葡萄生理和分子指标的测定，以及蔗糖对aba代谢的影响，分析葡萄果实的发育成熟机理，为以后蔗糖与aba协同调控的基因及调控葡萄果实发育成熟进程的信号网络的构建奠定基础。

5. 研究计划与进展

5.1 年度研究计划：2015.1-2015.12：（1）开展实验的准备工作，主要是所需试剂盒、易耗品的购置，实验材料的采集；（2）藤稔葡萄果实各个发育时期果实的取样，测定藤稔葡萄果实发育过程中糖、酸、可溶性固形物、aba含量等的生理指标变化。

（3）提取藤稔葡萄果实各个时期总rna进行反转；（4）利用northern blot和荧光定量分析成熟相关基因在藤稔葡萄果实发育过程中的变化；2016.1-2016.12:（1）aba和糖外源喷施处理对藤稔葡萄果实，分析成熟相关的生理指标；（2）ms温浴试验分析aba和糖对葡萄成熟相关基因的影响和糖对aba代谢的影响；（3）综合分析aba和糖在葡萄果实发育中的分子调控机理；（4） 全面总结实验结果，撰写研究论文、总结项目研究工作，准备上报验收材料以及提交研究成果。

5.2 预期研究结果：⑴与 aba和糖信号路径和果实上色软化有关的成熟基因在葡萄果实中的表达模式；⑵ aba和糖对果实成熟的生理和分子指标的影响； (3)糖对aba代谢的影响机理；⑷ 构建信号网络，分析aba和糖代谢路径在葡萄果实发育过程中的分子调控机理；⑸ 发表研究论文3篇，其中sci论文1篇，培养研究生2名。