番茄响应番茄黄化曲叶病时MYB类转录因子基因表达分析开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1.本课题的意义番茄是世界范围内广泛种植的主要蔬菜之一[1]，对农民增收起着重要的作用。

然而由于栽培面积不断增加，尤其是温室或是保护地栽培番茄，以及烟粉虱的扩散，致使番茄黄化曲叶病大面积快速蔓延，番茄病害愈发严重，给世界番茄产业造成极大的危害。

番茄黄化曲叶病是由番茄黄化曲叶病毒（tylcv）引起的一种严重危害番茄生产的病害，该病毒于1939～1940年在以色列首次被发现[2]，近年来在中国的多个番茄主产区大范围发生[3-4]。

2. 研究的基本内容和问题

一、研究目标本课题旨在通过qrt-pcr分析myb转录因子家族基因在番茄黄化曲叶病侵染过程中的差异表达情况，筛选目标基因，克隆并鉴定myb转录因子基因在番茄黄化曲叶病抗性中的功能。

通过本课题，期望达到以下目标：1.通过转录组测序，筛选出不同番茄品种响应tylcv过程中的差异表达的myb转录因子基因；2.结合转录组测序结果分析差异表达目标基因，进行不同番茄品种不同感染时期的荧光定量pcr反应，筛选出基因表达显著的基因；3.对差异表达的基因进行克隆及序列分析。

进一步分析响应关键基因在番茄抗tylcv中的作用。

3. 研究的方法与方案

一、研究方法1. 目标番茄myb基因的筛选根据已公布的不同抗性番茄品种响应tylcv转录组测序数据，分析差异表示的基因，筛选出目标myb转录因子基因。

2. myb转录因子基因在不同抗性番茄品种经番茄黄化曲叶病侵染后的表达分析种植番茄抗性和感病品种（浙杂-301和金鹏1号），当叶片长至2叶期时，将健康的不同抗性番茄植株移至有带毒烟粉虱的大棚接种黄化曲叶病毒，以不接种病毒的植株作为对照。

收集不同抗性品种处理后0、2、4、6、7、14d 的侵染组和对照组叶片，提取全基因组rna并反转录成cdna，作为qrt-pcr模板。

4. 研究创新点

1.随着番茄黄化曲叶病的发病率日益加重，番茄黄化曲叶病已经逐渐成为影响番茄生产最严重的病害之一，传统防治番茄黄化曲叶病的方法具有一定的局限性，因此挖掘抗病相关基因在番茄抗病育种上尤为重要。

myb类转录因子基因在其他物种中也证实其可能参与调控植株抗病过程，但在番茄中该类型基因应对黄化曲叶病侵染时的作用尚未清晰，因此，研究番茄myb转录因子基因在番茄黄化曲叶病抗性方面的功能及作用对提高番茄的抗病性有着重要的意义。

2.内容清晰，层次性强。

5. 研究计划与进展

12017.9-2018.1完成2种不同抗性番茄品种响应tylcv的相关基因在不同番茄品种不同感染阶段表达谱进行分析，分析其差异响应基因。

22018.2-2018.3基于已经测序公布的番茄基因组数据，为目标myb转录因子基因设计引物，完成myb基因的克隆。

32018.3-2018.5对克隆所得基因进行序列分析，整理实验结果，撰写毕业论文。