菊花泛素结和酶基因的克隆与表达分析开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1、本课题的意义

本课题通过介绍泛素结合酶的相关理论知识，针对泛素化过程和三种蛋白酶的不同作用，重点突出了e2蛋白功能，并通过大量国内外文献研究植物基因克隆现状，分析了在多种非生物胁迫处理下植物基因的表达特征。目前在国内对e2酶的研究还相当匮乏，为了揭示e2在植物先天免疫中的作用，本课题选取菊花泛素结合酶基因进行克隆，从菊花转录组库中获得编码拟南芥同源基因序列信息，根据ncbi比对确定基因的cdna全长并进行克隆，再利用生物信息学方法对该蛋白的功能和活性位点进行预测，同时利用实时定量 pcr分析了在非生物胁迫条件下该基因的表达变化。对其表达特征进行初步的分析，为其功能研究奠定基础。

2、国内外研究概况

2. 研究的基本内容和问题

研究的目标、内容和拟解决的关键问题

1、研究目标

旨在克隆菊花泛素结合酶基因,并初步分析其表达特征,为其功能研究奠定基础。

3. 研究的方法与方案

1、研究方法

选取菊花泛素结合酶基因进行克隆，从菊花转录组库中获得编码拟南芥同源基因序列信息，根据ncbi比对确定基因的cdna全长并进行克隆，再利用生物信息学方法对该蛋白的功能和活性位点进行预测，同时利用实时定量 pcr分析在非生物胁迫条件下该基因的表达变化。

2、技术路线

4. 研究创新点

特色或创新之处

本实验涉及的技术均已成熟，也在各种蔬菜、花卉植物上进行过应用。但针对菊花泛素结合酶的研究并不全面，仍有巨大的研究空间。

5. 研究计划与进展

1、研究计划

第一阶段：（2018年3月—5月）

（1）确定研究方向，收集资料，整理资料。