过量表达DCMYB7促进番茄花青苷的合成开题报告

全文总字数：4971字

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

一、本课题的意义、国内外研究概况、应用前景等

1.1本课题的意义

番茄(solanum lycopersicum l．)是一种在全世界范围内广泛种植的蔬菜作物，也是一种重要的模式植物。外形鲜亮，内含多种营养物质，如类胡萝卜素、维生素、花青苷。据测定，每一斤番茄中维生素c的含量多达52毫克。除了很高的食用价值，番茄在现代医学上也有重要意义。现代医学认为，番茄能促进唾液和胃液的分泌，增加胃内酵素，帮助消化[1]。在国外番茄还有“金苹果”，“爱情果”的美称，内含番茄素具有利尿和助消化作用，对肾脏病患者尤为有益。另外，番茄中的烟酸具有降低毛细血管通透性，防止毛细血管破裂和血管硬化，预防高血压的发生。烟酸还具有能调节甲状腺功能和增强抗坏血酸的生理作用[2]。myb转录因子参与了植物积累花青苷过程，对番茄花青苷具有调控作用，对果实的形成及其营养价值具有重要影响。所以本研究对于提高番茄品质具有重要意义，有利于我国蔬菜产业的发展。

2. 研究的基本内容和问题

二、研究的目标、内容和拟解决的关键问题

2.1研究目标

验证dcmyb7基因能否促进番茄花青苷合成。

3. 研究的方法与方案

三、研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析

3.1研究方法

提取‘deep purple’紫胡萝卜中的总rna，进行反转录。根据胡萝卜全基因组和转录组数据库中的碱基序列信息设计引物，从‘deep purple’紫胡萝卜中克隆出dcmyb7基因，都各自构建在camv-35s启动子和nos终止子之间，然后分别构建到pcambia2300植物表达载体上，电击转化至根癌农杆菌(agrobacteriumtumefaciens)gv3101中。将含有目的基因的农杆菌侵染番茄外植体，在筛选培养基上经过脱分化和再分化获得抗性植株。利用gus染色进一步确认转基因植株后，转入营养土中继续生长。待成熟以后，观察转目的基因的番茄是否产生花青苷而呈紫色。并通过实时荧光定量pcr检测转基因番茄中dcmyb7以及花青苷合成相关结构基因的表达量，与转空载体番茄作比较。

4. 研究创新点

四、特色或创新之处

本实验将通过转基因过量表达dcmyb7基因是否能促进番茄花青苷合成。主要体现在实验基因种类上的研究创新。

5. 研究计划与进展

五、研究计划及预期进展

5.1研究计划

2018.3-2018.4：从‘deep purple’紫胡萝卜中克隆出dcmyb7基因，构建到pcambia2300植物表达载体，将其转化到农杆菌。