植物生长调节剂和选择试剂对森林草莓Hawaii 4再生的影响开题报告

1. 研究目的与意义

植物生长调节剂在植物组织培养中虽然用量很小，但生理效应大，起着重要的调节作用。合适的激素配伍，可以促进植物细胞的分裂、愈伤组织形成以及分化等过程。

植物生长调节剂是指由人工合成的、能够调控植物生长发育的化学物质。根据性质(与植物激素的相似性质)不同，将植物生长调节剂划分为九类：生长素及相关化合物、赤霉素类、细胞分裂素及其相关化合物、乙烯及其相关化合物、生长抑制剂类、生长延缓剂类、油菜素内酯、复合型调节剂类。在植物组培中常用的生长调节剂有2,4-d，萘乙酸(naa)，吲哚乙酸(iaa)，吲哚丁酸(iba)， 6-苄氨基嘌呤(6-ba)，赤霉素(ga3)等。

遗传转化可以帮助植物更好地应对生物和非生物胁迫，从而更好地适应各种环境。然而，合适的选择性试剂对于遗传转化系统是必需的。标记基因（npt ii，bar，hpt等）对选择性试剂产生抗性，如卡那霉素（alsheikh等，2002），遗传霉素（mathews等，1995），潮霉素（mathews等，1995）和草铵膦（也称为草丁膦），通过抑制未转化芽的生长，有助于转化植物的选择（karami等，2009）。然而，选择性试剂也可能对植物再生产生一些负面影响（karami等，2009）。因此，选择合适的选择性试剂并确定选择性试剂的适当浓度至关重要。

2. 研究的基本内容和问题

研究目标：森林草莓（fragaria vesca）是蔷薇科物种的代表模式作物。植物生长调节剂的平衡是组织培养成功获得再生幼苗的决定性因素。此外，在植物转基因过程中，由于标记基因存在，再生培养基中选择性试剂的浓度可对转基因植物进行筛选。为了建立高效的森林草莓hawaii 4再生体系，本文拟探索森林草莓hawaii 4再生的最适激素配伍；此外，为了后续转基因体系的建立，我们还拟研究hawaii 4对于潮霉素和草铵膦的最小致死浓度。

研究内容：我们拟研究不同植物激素配伍对于森林草莓hawaii 4再生的影响，以期找出最适激素配比。在本研究中，我们拟研究不同浓度的tdz，6-ba和玉米素与iba配伍对hawaii4叶片外植体芽再生的影响，以评估最优组合和最佳浓度。此外，我们使用潮霉素和草铵膦作为选择剂对hawaii 4叶片进行试验，以此确认最小致死剂量。

3. 研究的方法与方案

1.研究方法：

(1)材料准备

二倍体森林草莓 hawaii 4的种子首先在水中浸泡、消毒，接种到培养基上。然后，首先将这些培养瓶置于4℃的冰箱中14天，然后置于具有16 / 8h昼/夜光周期的生长室中，发光强度为2000μmm-2 s-1和 23/18°c亮/暗温热周期，每隔3周定期传代培养。6周后，选择合适的组培苗幼苗进行实验。

4. 研究创新点

本研究拟以森林草莓Hawaii 4为研究对象，研究不同浓度的TDZ，6-BA和玉米素与IBA结合诱导其叶片再生的效率，并找到最适激素配伍。此外，我们拟试验Hawaii 4的叶片对潮霉素和草铵膦作为选择剂的敏感性，以确认遗传转化时可使用的最小致死剂量。由此可为森林草莓的转基因再生体系的建立提供理论和实践基础。

5. 研究计划与进展

1.1-2月份：查阅资料，撰写开题报告

2. 2-3月份：材料准备