1. 研究目的与意义
针对稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae),构建该病原菌转运蛋白MFS1基因的敲除载体,并通过聚乙二醇介导的原生质体转化进行基因敲除;筛选出2-3个基因敲除转化子,并对其致病性等相关表型进行测定
2. 国内外研究现状分析
近十多年来,水稻-稻瘟病菌互作机制研究取得了很大发展,包括稻瘟病菌入侵全过程的动态监测,稻瘟病菌全基因组的测序、基因预测和功能分析,抗病蛋白与无毒蛋白互作证据的发现等,nbs鄄lrr 在水稻抗病过程中的功能等。
水稻-稻瘟病菌的互作已成为研究植物与病原物互作的模式系统,但水稻-稻瘟病菌互作方面仍有以下一些问题有待进一步的研究。
虽然在这方面已经取得了一些进展,真正的权力,这个模型系统将无法完全实现,直到饱和遗传图谱,以允许快速的基于地图的克隆。
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3. 研究的基本内容与计划
稻瘟病菌聚乙二醇介导的原生质体转化1)基因敲除载体构建:根据magnaporthe oryzae基因组网站下载mfs1上下游基因序列,根据同源重组原理,设计敲除载体构建引物。
2)原生质体转化:载体构建完毕后,提取质粒,进行原生质体转化。
该转化体系主要包括原生质体制备;peg介导的转化两部分。
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4. 研究创新点
本研究中利用同源重组原理构建稻瘟病菌转运蛋白MFS1基因敲除载体,并通过原生质体方法进行转化并筛选出该基因敲除突变体,与其他物种中该基因研究结果比较,分析其异同点,指出研究不足以及待解决的问题
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