春兰B类MADS-box基因DEF3转基因载体的构建开题报告

1. 研究目的与意义

目前兰科植物花器官发育 MADS-box 基因研究方面已有一定的进展，但由于兰科植物花器官形态的高度特化性，其花器官发育分子机理研究历程还很漫长，对兰花的研究主要集中于蝴蝶兰、文心兰和石斛等热带兰及部分国兰中，兰科植物种类繁多，而研究的兰花种类相对较少且集中，随着以后实验技术和水平的不断提高，对兰花花发育基因调控系统将有更加深刻的认识。

本次试验通过对春兰B类MADS-box基因DEF3转基因载体的构建，熟悉花器官发育分子机理，后期把已知功能调控基因导入到植物体内，这可能会获得我们所需植株的株型和花型等，这对兰花的生产及商业价值带来巨大意义。

2. 国内外研究现状分析

Tsai等从姬蝴蝶兰(Phalaenopsis equestris)中分离得到了四个B类AP3/DEF-like基因，分别为PeMADS2、PeMADS3、PeMADS4、PeMADS5。研究显示PeMADS2在萼片和侧瓣中表达较强，在唇瓣及蕊柱中表达较弱，而PeMADS3则在侧瓣和唇瓣中表达较强，在蕊柱中表达较弱，PeMADS4只在唇瓣及蕊柱中表达且表达较强，PeMADS5在侧瓣中强表达，在萼片、唇瓣和和蕊柱中弱表达。Hsu和Yang从文心兰(Oncidium Gower Ramsey)中克隆得到了花发育B类AP3/DEF-like基因的OMADS3。OMADS3在所有的花器官和营养器官中均有表达。

3. 研究的基本内容与计划

内容：概述目前5种常用的转基因载体的构建技术和试验方法以及兰科植物花器官发育调控基因研究进展，通过对春兰b类mads-box基因def3转基因载体的构建，了解花器官发育分子机理。

计划：2016年12月－2017年1月，目的基因质粒以及pcambia-1302植物表达载体质粒的提取；

2017年1月－2017年2月，目的基因质粒以及pcambia-1302植物表达载体质粒进行双酶切；

4. 研究创新点

目前国内对春兰B类MADS-box基因DEF3转基因研究较少，本研究构建了基因载为进一步研究基因功能创造条件。