南京城郊典型蚓粪资源中重金属及其抗性基因调查开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

（1）课题的意义多数重金属如砷、铅、汞、镉、铬等是对生态环境危害极大的一类污染物，因其进入环境后不能被生物降解，而往往是参与食物链循环并最终在生物体内积累，破坏生物体的正常生理代谢活动，严重危害生物体健康[1]。

近年来，集约化养殖中铜、锌、铁、砷等微量元素常用于调节动物代谢、促进动物生长而添加于饲料中，畜禽对这些重金属的消化吸收利用率低，导致重金属未被利用而随畜禽粪便排出体外[2]。

利用蚯蚓处理畜禽粪便，能够形成一种极强生物活性、高肥效的有机肥，但畜禽粪便中高浓度重金属会进一步导致蚓粪中重金属的富集，对环境安全及生物健康产生威胁。

2. 研究的基本内容和问题

（1）研究的目标近年来，集约化养殖中铜、锌、铁、砷等微量元素常用于调节动物代谢、促进动物生长而添加于饲料中，畜禽对这些重金属的消化吸收利用率低，导致重金属未被利用而随畜禽粪便排出体外。

利用蚯蚓处理畜禽粪便，能够形成一种极强生物活性、高肥效的有机肥，但当蚯蚓体内重金属浓度超过其耐受极限时就会随蚓粪一起排出体外，导致蚓粪中重金属含量增加，从而诱导重金属抗性细菌的产生。

本实验使用蚓粪中分离出的重金属抗性细菌，通过观察菌株形态学特征等方法对重金属抗性细菌进行鉴定。

3. 研究的方法与方案

（1）研究方法2.1蚓粪的采集从南京周边饲养蚯蚓的农场共三个地点进行采样，每个地点采样1kg蚓粪。

样品采集完成后回来立即混匀，选取代表地点的蚓粪进行实验。

2.2重金属抗性细菌的分离分别取10g待测蚓粪样品，无菌操作下将其放入装有适量玻璃珠和90ml无菌水的三角瓶中，在旋转式摇床上150r/min、30℃振荡30min后分别稀释到10-4，10-5，10-6 ,10-7。

4. 研究创新点

特色和创新之处1. 本次实验使用蚓粪作为实验材料。

目前国内外对于蚓粪中重金属的含量已经有所认识，但是对于蚓粪中重金属抗性细菌的研究却少之又少。

2. 鉴定方法使用初步生理常规鉴定和分子生物学鉴定相结合的方式，提高了鉴定的准确性。

5. 研究计划与进展

研究计划及预期进展2018.3.1-2018.4.1 查阅资料，确定实验方案，熟悉实验相关操作。

2018.4.1-2018.5.1 进行实验。

2018.5.1-结题 进行毕业论文的撰写。