甲基营养型芽孢杆菌促生抗逆效应研究开题报告

1. 研究目的与意义

甲基营养型芽孢杆菌在国内外的研究中对蔬菜病害有着良好的生防效果。

本实验室从樱花中分离的甲基营养型芽孢杆菌yh-18对根癌农杆菌有着较好的拮抗能力。

所以继续探索菌株yh-18对林业常见病害病原菌的抑制效果。

2. 国内外研究现状分析

目前，已成功应用于植物病害防治的生防细菌主要来自芽孢杆菌属(bacillus)、假单胞菌属(pseudomonas)、沙雷氏菌属(serratia)、巴氏杆菌属(pasteuria)等，其中芽孢杆菌属和假单胞菌属细菌作为生防因子的研究最多。

由于本文实验材料菌株yh-18是一株甲基营养型芽孢杆菌，因此文献阅读侧重于芽孢杆菌属生防研究的进展与实际效能。芽孢杆菌属(bacillus)微生物生物防治目前在植物病害上的研究：

在李姝江，朱天辉，谯天敏，韩珊等人的研究中，发现蜡样芽孢杆菌bacillus cereu能在花椒根际和根内很好地定殖、排挤病原物，具有对花椒根腐病进行生物防治的潜力和良好的发展前景。在蔡文韬，夏菠，夏延斌，易有金，王宇婷等人的研究中，验证了辣椒的整个贮藏期间，解淀粉芽孢杆菌bacillus amyloliquefaciens能有效的控制辣椒的腐烂率，保持果实的色泽和质构，保持良好的感官品质，缓减果蔬营养品质的损失。但对于该菌的保鲜机制以及适宜的处理浓度有待进一步研究。在谢学文，董瑞利，石延霞，柴阿丽，朱发娣，李宝聚等人的研究中，两年的田间试验表明甲基营养型芽孢杆bacillus methylotrophicuswf-3培养物对黄瓜炭疽病具有良好的防治效果。在fernando m. romero等人的研究中，在布宜诺斯艾利斯的拉普拉塔市的不同园艺农作物中分离得到一株甲基营养型芽孢杆菌。并对番茄上的病原菌葡萄孢botrytis cinerea，丁香假单胞菌pseudomonas syringae，有拮抗作用。并发现其菌液发酵液对丁香假单胞菌有生长延缓的作用。在catello pane等人的研究中，从南意大利的巴蒂帕提亚的土壤中分离得到一株甲基营养型芽孢杆菌。对立枯丝核菌 rhizoctonia solani，小核盘菌rhizoctonia solani ，腐皮镰孢霉菌fusarium solani有拮抗作用。在john geraldine sandana mala等人的研究中，从皮革厂的淤积当中分离出一株甲基营养型芽孢杆菌。该菌可以降解铬元素cr，并且在野外实验中也有一定降解铬元素的能力。在venkadapathi jeyanthi等人的研究中，从印度金奈和杜蒂戈林的盐田中分离出一株甲基营养型芽孢杆菌。并分离到其代谢产物对苯二酚，该产物对革兰氏染色阳性及阴性病原细菌有拮抗作用，这也是关于耐盐性甲基营养型芽孢杆菌有着拮抗细菌的能力。在姜云等人的研究中，从甲基营养型芽孢杆菌中分离的抗菌蛋白可以对人生锈腐病菌cylindrocarpon destructans产生拮抗作用。在吕纪涛等人的研究中，从新疆库姆塔格沙漠中分离到一株甲基营养型芽孢杆菌。对建兰炭疽病病原菌胶孢炭疽菌colletotrichum gloeosporioides 有拮抗作用，并初步判断抗菌物质是蛋白质类物质的作用。在吕倩等人的研究中，从南海深海中分离出一株甲基营养型芽孢杆菌，也是第一次从海洋中分离得到该细菌。并从中分离出三种抗菌多肽，对立枯死很菌等植物真菌病原菌有拮抗作用。在刘伟，宋双，沈小英，安天赐，牛小义，安德荣等人的研究中，通过实验证明甲基营养型芽孢杆菌bacillus methylotrophicuslw-61能显著抑制番茄灰霉病菌(botrytis cinerea)的生长。在郭小英，刘慧平，韩巨才等人的研究中，通过实验论证得到植物内生细菌lp5发酵液对黄瓜白粉病有良好的防治效果。在孔少元，王世英，张冬冬等人的研究中，通过实验结果表明一株甲基营养型芽孢杆菌z-9对小麦全蚀病有较好的防治效果，防效最好的施用方法是浇种。在曹丽亚，陈大欢，郭荣艳，何丹丹，杨 沫，霍耀星，韩俊华的人的研究中，一株多黏类芽孢杆菌 ＨＴ-16 对梨采后黑斑病的发生有显著的抑制效果。在刘莎莎，程园园，张丹，王晓丹，刘佳莉，郭长虹等人的研究中，地衣芽孢杆菌（bacillus licheniformis）cyy-6，短短芽孢杆菌（brevibacillus brevis ）cyy-42均对由尖孢镰刀菌引起的紫花苜蓿根腐病有很好的防治效果。

3. 研究的基本内容与计划

内容：

（一）该菌株的在林业常见病害的抑菌谱尚不清楚值得探究，即基于实验室现有的病原菌与该菌进行平板对抗实验；

（二）对该菌的胞内抑菌酶类进行探索，即磷酸酯酶，纤维素酶，蛋白酶，几丁质酶，嗜铁素酶的平板实验；

（三）对该菌的胞外抑菌物质的探索，即对酸沉淀后的产物高压灭菌并进行平板对抗实验；

（四）根据实验结果对该菌林业病害生防效能进行前期评估。

计划：

4. 研究创新点

甲基营养型芽孢杆菌是一种新的菌种，目前还没有太多相关记载，所以我需要在相关生防菌的研究基础上去研究该病原菌，可以说一切都是创新。