香蕉抑病型土壤抑制病原菌侵染研究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1、本课题国内外研究概况、应用前景等香蕉（musa spp）属芭蕉科（musaceae）、芭蕉属（musa）、真蕉亚属的单子叶草本植物，香蕉是食用蕉的俗称，包括鲜食蕉和煮食蕉2个类型。

香蕉是中国华南地区四大佳果之一，也是世界著名的热带、亚热带水果。

其不仅营养丰富，而且茎、花、果、根等都有较高的药用价值，在一些发展中国家，香蕉甚至是主要的食物来源。

2. 研究的基本内容和问题

（一）研究目标本研究从抑病蕉园和导病蕉园土壤抵御外源病原菌入侵差异着手，比较土壤微生物群落在病原菌入侵是的响应差异，解析抑病蕉园土壤抵御病原菌入侵的土壤微生物生态学机理，为防控香蕉土传枯萎病提供理论依据。

（二）研究内容1）利用可培养技术，分析海南天地人与美台两处蕉园的抑病型土壤与非抑病型土壤对接入的不同浓度病原真菌的可培养微生物区系差异。

2）利用高通量测序的分子生物学技术，分析海南天地人与美台两处蕉园的抑病型土壤与非抑病型土壤对接入的不同浓度病原真菌的土壤微生物整体区系差异。

3. 研究的方法与方案

（一）研究方法（1） 可培养真菌、细菌、病原菌及放线菌数量的测定：采用细菌、真菌、病原菌、放线菌选择性培养基培养法测定涂布测定。

（2） 土壤总dna的提取采用ultraclean gelspin dna extraction kit提取。

（3）送样测序及测序结果的分析比较：将合格dna样品直接送至国家人类基因组南方研究中心或北京诺禾致源生物信息科技有限公司或上海派森诺生物科技有限公司委托测序，利用mothur、qiime 或rdp在线分析平台对高通量测序产生的原始数据进行分析，包括降低序列错误，序列质量控制，嵌合体检测，otu分类以及alpha和beta多样性的计算。

4. 研究创新点

虽然抑病型土壤微生物区系特征的解析一直是热点研究方向之一，但有关香蕉抑病型土壤微生物区系特征解析及其形成机制的研究尚未完全展开。

如果本实验研究表明抑病型蕉园土壤能够抵御病原菌的侵染，并阐明其中的微生物生态学机理，那么对现今香蕉枯萎病的有效防治将有相当大的益处。

5. 研究计划与进展

2015/06/01~2015/06/15抑病型土壤采集，导病型土壤采集2015/06/15~2015/07/01病原菌培养及孢子收集2015/07/15~2015/10/15接菌培养，可培养法研究微生物群落并留样2015/10/15~2015/11/15提取样品DNA，测序预实验2015/11/15~2016/01/15高通量测序法研究微生物群落2016/03/01~2016/04/01数据分析整理2016/04/01~2016/05/01阐明香蕉抑病型土壤抑制病原菌侵染机理2016/05/01~2016/06/15论文写作