水稻缺磷响应基因OsWRKY-P-4的突变体鉴定及其功能验证（Identification and functional analysis of the rice phosphorus starvation response gene OsWRKY-P-4 knock out mutants）开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

本课题的意义、国内外研究概况、应用前景等（列出主要参考文献）1. 本课题的意义水稻是世界上最重要的粮食作物之一，全球半数以上人口以大米为主食。

我国是世界上水稻种植面积最大的国家，占世界水稻种植面积的20%，其产量占我国粮食总产的44%，是保证我国粮食安全的最重要的作物。

磷（phosphorus, p）是植物生长发育必需的大量营养元素之一，是许多生物大分子的重要组成部分(bieleski, 1973; raghothama, 1999)，并且广泛参与植物体内各种生化合成、能量转移和信号转导等过程(严小龙，1997)。

2. 研究的基本内容和问题

1. 研究目标本实验通过反向遗传学方法通过水稻oswrky基因家族与已报道的拟南芥atwrky基因的进化树分析，以及在不同磷水平处理下，基因表达模式的分析，挑选出候选基因oswrky-p-4，并通过crispr/cas9技术获得水稻oswrky-p-4的转基因突变体材料，初步探究其在调控水稻磷素吸收或转运方面的作用。

2. 研究内容（1）进化树分析（2）oswrky-p-4在不同磷水平处理下，不同部位的表达模式分析。

（3）t1代转基因突变体材料的鉴定。

3. 研究的方法与方案

研究的目标、内容和拟解决的关键问题1. 研究目标本实验通过反向遗传学方法通过水稻oswrky基因家族与已报道的拟南芥atwrky基因的进化树分析，以及在不同磷水平处理下，基因表达模式的分析，挑选出候选基因oswrky-p-4，并通过crispr/cas9技术获得水稻oswrky-p-4的转基因突变体材料，初步探究其在调控水稻磷素吸收或转运方面的作用。

2. 研究内容（1）进化树分析（2）oswrky-p-4在不同磷水平处理下，不同部位的表达模式分析。

（3）t1代转基因突变体材料的鉴定。

4. 研究创新点

目前在拟南芥中报导的与磷相关的wrky家族的有atwrky75、atwrky45、atwrky6、atwrky42。

而水稻中报导的与磷相关的wrky家族转录因子目前只有oswrky74，因此该家族中可能还存在其他与磷相关的转录因子，而oswrky-p-4可能就是其中之一。

并且实验表明该基因是受缺磷负调控的基因，因此该转录因子很有可能对下游某个pt存在着负调控关系。

5. 研究计划与进展

1. 2016年3月初-2016年4月初 材料准备，发苗，水培处理2. 2016年4月初-2016年4月底 总RNA提取并反转录、Q-PCR；突变体材料鉴定、植株Pi的提取及突变体中Pht1家族部分成员的表达的测定3. 2016年5月初之后数据分析，撰写毕业论文