1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
1.1 课题意义:水稻是我国最重要的粮食作物之一,全国水稻种植面积约占粮食作物面积的30%,产量接近粮食总产量的一半。
我国有一半以上人口以稻米为主食,它是我国居民饮食中热量和各种营养元素的主要来源(刘建祥等,2002)。
与此同时,水稻也是世界(特别是亚洲地区)主要的粮食作物。
2. 研究的基本内容和问题
2.1研究目标虽然大量的分子遗传学研究集中在磷的调控机制上,但由于磷在植物体的重要性,它的调控非常精细复杂,其调控机制仍不清楚。
水稻是最重要的粮食作物之一,也是最为重要的模式植物之一。
在水稻基因组有13个基因编码的蛋白大部分都属于pht1高亲和磷转运蛋白家族,除了磷转运蛋白ospht1;1(ospt1),ospht1;2(ospt2),ospht1;4(ospt4),ospht1;6(ospt6),ospht1;,8(ospt8),ospht1;11(ospt11)和ospht1;13(ospt13)的功能被报道外,我们对其余成员的功能还不清楚。
3. 研究的方法与方案
3.1研究材料3.1.1水稻粳稻品种日本晴(oryza sativa l. japonica. cv. nipponbare),水稻粳稻品种dongjin(oryza sativa l. japonica. cv. dongjin)3.1.2所用工程菌菌株:酵母异源表达系统:酵母磷转运突变体ey917(Δpho84 Δpho87 Δpho89 Δpho90 Δpho91);根癌农杆菌:eha105;大肠杆菌:trans-t13.2手段和方法3.2.1 rt-pcr和q-pcr:采集所需的植物样品,提取rna,并用反转录试剂盒(takara)进行rt-pcr反应,将rna反转录为cdna;再利用特异引物进行q-pcr反应,分析目的基因和内参之间的相对表达量。
3.2.2 水稻组织培养和转基因材料的创制:将水稻野生型种子经过消毒、诱导、继代后,用构建好的农杆菌侵染愈伤组织,经过选择培养之后,分化并生根,经过鉴定之后即可得到阳性转基因苗。
3.2.3 酵母异源表达:将带有ospt7基因的质粒转化进酵母磷转运突变体ey917,在不同磷浓度下进行打点实验,观察酵母菌落的形态。
4. 研究创新点
阐明了花药特异表达的OsPT7在花药发育中的功能。
5. 研究计划与进展
5.1研究计划2018年3月:各种转基因材料的创制及相关试验的初步进行。
2018年3月至2018年5月:利用目标基因的组织定位材料切片分析其定位;利用水稻原生质体确定ospt7的亚细胞水平定位;利用目标基因ospt7的突变体材料研究其生物学功能。
2018年6月:撰写毕业论文,答辩。
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