木霉菌与病原菌定殖长期施不同肥料土壤效应研究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

.试验目的本试验的目的在于评估不同肥力土壤应对病原菌和有益菌入侵的能力；研究致病型病原菌和非致病型病原菌的致病关系；探明不同肥力土壤差异性微生物抵御外源生物入侵的机制；为土传病害防控和有益微生物有效定殖提供理论支撑。

2.国内外研究进展目前，已有大量报道指出，木霉生物有机肥对番茄、黄瓜、豆类、马铃薯、棉花、水稻、花卉、牧草等多种作物有促生作用。

黄有凯（2003）筛选出具有促生作用的高产哈茨木霉突变菌株-h-13，黄瓜大田试验后发现以稀释50倍的发酵液喷施，黄瓜幼苗的促生效果最明显。

2. 研究的基本内容和问题

1.研究目标本试验的目标在于通过涂布测数对3种长期不同作用的土壤中的木霉数量情况进行测定，从而了解是否木霉在长期施用生物有机肥的土壤中定殖情况明显优于其他两种土壤，若试验得出的结论为木霉在长期施用生物有机肥的土壤中的定殖情况优于其他两种长期作用的土壤(不施化肥土壤、施用化肥土壤），则今后大田生产中将施用生物有机肥，从而使作物高产。

换言之，本试验在于间接证明生物有机肥是否优于化肥。

2.研究内容长期不同施肥模式导致的不同肥力土壤，存在显而易见的微生物群落差异，会形成不同抵御外来微生物入侵的能力。

3. 研究的方法与方案

1.研究方法 在进行稀释涂布之前进行培养基的配制。

本试采用孟加拉红培养基，具体配制方法如下：(本试验需要配制6瓶孟加拉红培养基） 称取48.88g的孟加拉红琼脂，溶于1330ml的去离子水中，搅拌使其完全溶解。

称取4份琼脂条，每份称取2g琼脂条，将琼脂条加入培养瓶中，并将之前配好的孟加拉红琼脂溶液加入培养瓶中(每份330ml），进行灭菌。

4. 研究创新点

经查阅文献，之前关于木霉的研究多为研究其促生机理、木霉对磷及微量元素的活化作用等方向，或者偏向于研究木霉对防治辣椒疫病或黄瓜枯萎病等的防治。

而本试验的创新之处在于将木霉入侵于长期不同作用的土壤之中，测定木霉在土壤中的定殖情况，直接的比较了各施肥土壤的微生物生长情况，并通过各施肥土壤中微生物数量来反映哪种施肥土壤更有利于作物高产。

并且本试验不是单一的进行研究木霉对某一土传病害的影响，而是将以往的实验进行了整合，做一次综合的比较研究，具有综合性。

5. 研究计划与进展

2018.1.15采取土样(海南香蕉土、南京黄瓜土）2018.1.22-2018.2.5预培养2周2018.2.5 接菌(木霉105CFU/g soil）、0天采样2018.3.7-3.13 1个月采样、涂布计数2018.4.6-2018.4.12 2个月采样、涂布计数2018.4.12-2018.2018.4.22提取DNA