1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
一、本课题的意义水稻是世界上最重要的谷类作物之一,养活了世界上一半以上的人口。
由于世界人口的迅速增长和耕地面积的减少,水稻生产的改善仍然是水稻育种工作的一大挑战。
颗粒大小和叶片角度是决定水稻产量的两个重要性状,一直是育种项目的考虑因素【1】。
2. 研究的基本内容和问题
四、研究目标及内容1、oswrky-p1在转录和蛋白水平的时空表达特征。
其主要包括oswrky-p1在转录水平和蛋白水平对激素的响应情况、oswrky-p1亚细胞水平和组织水平的定位分析。
2、oswrky-p1在水稻磷株型调控的生理功能。
3. 研究的方法与方案
六、研究方法及技术路线1、 crispr-cas9介导的基因突变 本研究将采用针对水稻优化crispr-cas9系统,以及根据一系列标准严格筛选的基因特异spacer 对oswrky-p1及相关基因进行突变。
对t0代转基因植株即提取总dna进行分子检测, 对纯合突变株 (一对染色体突变类型完全一致) 和biallelic突变株 (一对染色体突变类型不一致但各自的突变类型均导致基因失去功能) 进行进一步的鉴定和繁种。
2、细胞形态学分析3、(q)rt-qpcr 基因表达分析 对以上生理参数测定实验中的材料的根部和叶片同时进行采样,液氮速冻后于-70℃储存。
4. 研究创新点
八、特色或创新之处本实验通过对水稻转录因子OsWRKY-P1的调控机制的研究,发现了一个独立于磷信号的转录因子。
同时参与了两种植物激素的合成和信号转导,而一般的转录因子只参与到一种植物激素的合成,因此,该转录因子的研究具有重要意义。
5. 研究计划与进展
九、研究计划及预期进展1、2018年3月初-2018年4月初 OsWRKY-P1超表达材料(不含任何标签)以及osiaa1(和 osgh3.2、OsGSK2超表达材料)创制2、2016年4月初-2016年4月底 OsWRKY-P1过表达材料叶领部位的切片。
OsWRKY-P1超表达材料对油菜素内酯的响应3、2016年5月初之后数据分析,撰写毕业论文
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