1. 研究目的与意义
1 银杏资源概述
银杏(ginkgo biloba l.)起源于3亿年前,是裸子植物银杏纲银杏科银杏属唯一存在的古老树种,被公认为为活化石。第三纪末及第四季初,在北半球发生巨大冰川以后,这一孑遗的活化石,仅在受冰川影响最小的我国长江流域一带的群山中保存了下来。大约1300年前,银杏传入朝鲜和日本,18世纪相继传入欧洲、美洲,继而遍布全世界,我国是世界银杏的最后天然产地和现代银杏的发源地。目前,银杏已被我国正式定为二级保护植物和二级珍贵树种。
2 形态及地理分布
银杏是高大落叶乔木,树干直立,高可达30一40米,胸高直径可达3米,壮龄的树冠为圆柱形,老龄树冠近似圆球形.雌雄异株。雄株的大枝为下垂状,雌株的大枝向上,树皮幼时粗糙,有纵皱纹,渐为龟裂状。芽卵状三角形,钝尖头,芽鳞鲜褐色,其下有鲜明的叶痕。叶片扇形,长810厘米,宽68厘米,基部楔形,上缘圆平,中间2裂,似鸭掌。花单性,雄花序为柔荑状,雌花施23个聚生于1个短枝上。种子核果状,倒卵形或椭圆形,长约3厘米,成熟时黄色,微被白粉,子叶两枚,35月份开花,9一10月份种子成熟。
我国的银杏大致分布在北纬1940~4340,东经9700~12630,除黑龙江,吉林,内蒙古,青海,西藏外,其它各省区均有分布。我国是银杏的故乡,现有资源占世界银杏资源70%以上,大面积种植区有山东,江苏,安徽,浙江,江西,河南,湖南,湖北,广西,四川等省的60多个县市。
2. 国内外研究现状分析
1 银杏萜内酯
银杏内酯属二萜内酯,具有3个r-内酯环和一个叔丁基,是银杏特有的化合物。据其官能团差异可以分为银杏内酯a、b、c、j、m、k、l(ga、gb、gc、gj、gm、gk、gl)七种,主要存在于叶片和根内,是目前为止发现的唯一拥有叔丁基官能团的天然物质。银杏内酯对血小板及心血管疾病有很好的疗效,有抗过敏、抗休克、抗菌、抗炎症等作用,其中gb活性最强。
1991年,美国哈佛大学的学者carrier因发现银杏内酯b的分子结构而荣获诺贝尔奖。随后,银杏提取物的用途得到更深入、广泛的研究。 1993年,韩国科学家研究表明,其组织培养物中银杏内酯b的含量为0.0009%-0.0038%。
文献表明,根、胚、子叶等在固体培养时gk产物有a、b 两种,而根在悬浮培养时只产生gb ,这对于生产gb 非常有利。
3. 研究的基本内容与计划
1 研究内容
1)悬浮细胞培养容量、培养时间,细胞的色度、密度等条件的探索,细胞培养黄酮和内酯增产的培养方式,探讨两者在细胞代谢中的相互关系。
2)探索银杏悬浮细胞发根诱导方法,筛选最优条件
3)通过添加外源物质和改变环境条件的方法研究银杏次生代谢物的调控机理
4. 研究创新点
1)稀土元素铈引入银杏悬浮细胞培养对于次生代谢物的影响研究较少,本课题将深入探索其调控机理
2)鲜见NaCl、发根农杆菌应用于银杏悬浮细胞调控的报道,本课题将做进一步探索。
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