松材线虫种群遗传多样性的ISSR标记的建立及优化开题报告

1. 研究目的与意义

本研究主要是通过收集我国松材线虫病疫区的松材线虫样本，运用issr分子标记的方法来研究不同来源松材线虫群体的遗传多样性和遗传结构，计算出它们遗传距离的远近。

从dna分子水平阐述其遗传变异。

并通过聚类分析图谱进一步分析松材线虫在我国可能的传播路径及扩散的状况。

2. 国内外研究现状分析

陈蔚诗（2006）利用RAPD技术，对来自全国13个省的173个松材线虫株系，以及日本的5个株系和美国的1个株系，及6个拟松材线虫株系进行了遗传多样性研究。结果分析了松材线虫在我国可能的扩散和传播动态。孙捷等（2008）对来自中国最早发病的5个省和日本疫区的松材线虫共10个居群进行遗传多样性和系统发育分析，拟从分子水平探讨松材线虫病在中国蔓延的可能途径。结果表明：中国松材线虫居群间存在明显的遗传差异，该结果还揭示：木制品的调运等人为远距离传播是松材线虫在我国蔓延的主要途径之一。

Metge等（2006）采用RAPD与ISSR对来自美国、加拿大、日本、中国、韩国以及葡萄牙的30个松材线虫虫株进行了研究，聚类分析结果表明，葡萄牙的松材线虫很有可能是由东亚传入，而不是由北美传入的。Jongwoo等（2010）运用AFLP技术对韩国、日本和中国的松材线虫虫株进行了遗传变异的分析，结果表明，松材线虫种间具有具有较高的遗传变异，韩国的虫株与中国虫株的遗传距离更近。

3. 研究的基本内容与计划

1.松材线虫的扩大培养及基因组dna的提取（2011.2~2011.3）

2.松材线虫issr反应体系的建立及优化（2011.3~011.4）

3.松材线虫多态性引物的筛选（2011.4~2011.5）

4. 研究创新点

1. 国内首次采用ISSR标记对松材线虫种群的遗传多样性进行研究，分析不同地理来源松材线虫的遗传距离。

2.根据中国松材线虫种群的遗传距离，对其传播传播途径进行初步分析。