迎春樱总DNA提取开题报告

1. 研究目的与意义

樱属（Cerasus）植物隶属于蔷薇科（Rosaceae）李亚科（Prunoideae），为世界著名的观赏花木，其中多数种类遍植于世界各地，深受人们喜爱。中国拥有十分丰富的野生樱花资源，多数种类具有良好的园林观赏及食用价值，但开发利用的较少，园林利用樱花种类多引自日本，国产樱花的保护及开发利用等研究处于初级阶段，目前仅有樱桃（Cerasus pseudocerasus）、高盆樱（Cerasus cerasoides）、钟花樱（Cerasus campanulata）、野生早樱（Cerasus subhirtella var. ascendens）等少数种或变种进行过繁殖利用及遗传多样性方面的研究。

迎春樱（Cerasus discoidea）为中国野生樱属资源中的特有种，为华东地区重要的本土早春观花树种，花期较目前园林常用的东京樱花（Cerasus yedoensis）、山樱花（Cerasus serrulata）等早开近一个月，与部分梅花品种花期相同，且花色粉红、先花后叶、枝条细密、树形优美，是观赏樱花种的优良种，但开发利用极少，仅见于南京中山植物园、南京梅花山、杭州植物园、武汉植物园及江西农业大学对其进行园林利用，且多数为直接的野外成树移植。华东地区园林树种有限，园林樱花多源自于日本，品种单一，观花时节有限，对迎春樱的园林开发利用可进一步丰富华东地区的园林树种并扩大国产樱花的知名度。而对迎春樱分子标记方面的研究，为进行生物群体遗传多样性及其遗传结构特征研究和制定遗传改良策略奠定重要的技术基础，对迎春樱这一物种的保护、开发、利用具有深远意义。由于DNA分子标记实验是从研究生物个体的基因组DNA开始的，因此能否得到高质量的DNA自然成为DNA分子标记技术关键的一步。只有高质量的DNA，才能够获得理想的DNA带谱。

2. 国内外研究现状分析

1、dna提取方法研究现状

ctab法和sds法是dna提取常用的方法，但由于植物成分复杂多样，有些成分会大大影响提取效果，故一些人通过研究提出了改良的ctab法和改良的sds法，从不同程度提高了提取效果。

近年来通过试验提出，在ctab抽提液中加入pvp和β-巯基乙醇，能有效地去除细胞中的多糖和多酚类物质。罗志勇等在研究中对这种方法进行了几点改进：①提高ctab的浓度；②对于含多酚类较多的植物，增加ctab提取缓冲液中巯基乙醇的含量，同时加入pvp（聚维酮）使其与多酚类物质结合形成复合物；③增加低盐沉淀缓冲液的量；④增加高盐溶液中盐的浓度。用改进的方法从人参、西洋参、三七等药用植物中分离获得了高纯度的dna。shen yongbao等^[17]通过在ctab提取液中加入二氧化硅颗粒来吸附dna，试验结果表明该方法提取的dna纯度高，用于后续pcr等研究的效果也较好。

3. 研究的基本内容与计划

研究内容：

1、通过实验找到一种操作简单，高效省时的迎春樱dna提取方法。

2、对该方法进行dna纯度检测。

4. 研究创新点

国内外对迎春樱的科研成果比较少,涉及迎春樱分子方面的研究就更少了，而分子方面的研究是进行生物群体遗传多样性及其遗传结构特征研究和制定遗传改良策略的基础，对迎春樱这一物种的保护、开发、利用具有深远意义。

提取dna是进行分子实验的基础，由于迎春樱叶子成分的多样性，在去除基因组杂质方面还存在一定的困难，特别是迎春樱幼叶腺体十分丰富，分泌大量的粘质物质，为dna的提取带来一定的难度。

因此本实验试图探索一种高效的迎春樱总dna提取方法，为迎春樱分子方面的研究做铺垫。