吡咯伯克霍尔德氏菌JK-SH007工程菌构建开题报告

1. 研究目的与意义

洋葱伯克氏菌群的许多菌株是常见的生防菌，具有生物防治、生物降解及促进植物生长等多种功能。分离自杨树枝干部，burkholderia pyrrocinia jk-sh007属于洋葱伯克氏菌群（burkholderia cepacia complex，简称bcc）的基因型Ⅸ。bcc可以防治多种植物真菌病害，今年来防治腐霉病、立枯病和枯萎病等土传病害较多。

杨树溃疡病是一类危害严重的杨树枝干病害。近年杨树溃疡病大面积发生，严重威胁我国杨树产业的发展。最近研究发现，bcc对杨树溃疡病菌具有明显的抑制作用，并对杨树溃疡病有显著防效；增强杨树的光合作用能力，促进杨树生长；可长期定殖于杨树体内；并且对人类和植物不构成威胁。

所以，本次课题主要针对burkholderia pyrrocinia jk-sh007菌开展研究工作。对此菌群进行基因改造，将外源杀虫基因导入burkholderia pyrrocinia jk-sh007菌，使其成为集内生、促生、抗病、抗虫于一身的多功能生防菌。通过成功对bcc菌的基因进行改造可以有效的防治杨树溃疡病的发生，促进杨树速生丰产。

2. 国内外研究现状分析

国内外研究进展：

1.已研究出拮抗细菌吡咯伯克霍尔德氏菌burkholderia pyrrocinia菌株jk-sh007产抗菌物质的最佳发酵条件及其对杨树溃疡病的野外防治效果。最佳发酵条件是在初始ph7、牛肉膏2g、蛋白胨20g、以1/2装液量装液、30℃振荡培养36h可获得较高产量的胞外分泌型抗菌物质;菌株jk-sh007的发酵液对杨树溃疡病的野外防效可达40.54%。

2.在95杨的树干部分离到一株对3种杨树溃疡病病原真菌具有强拮抗作用的吡咯伯克霍尔德氏菌(burkholderia pyrrocinia)jk-sh007菌株。b.pyrrocinia jk-sh007菌株可产生多种抗菌物质来发挥其抗菌作用;菌体具有内生性,可在杨树体内长期定殖;对杨树溃疡病具有一定的防治作用。

3. 研究的基本内容与计划

（1）burkholderia pyrrocinia jk-sh007菌株抗虫工程菌的构建

（2014.2月2014.3月）

（2）杀虫晶体的活性蛋白检测及burkholderia pyrrocinia jk-sh007工程菌的稳定性研究

4. 研究创新点

在Burkholderia pyrrocinia JK-SH007工程菌已有的研究基础之上对菌株进行工程菌的构建。

以及对此工程菌的稳定性的表达进行测定，并且继续研究出Burkholderia pyrrocinia JK-SH007工程菌固有的特性。