新洋葱霍尔德氏菌NSM-05的生物安全性检测开题报告

1. 研究目的与意义

新洋葱伯克霍尔德氏菌NSM-05是实验室前期从松树茎部分离出的一株内生细菌。试验表明该细菌对多种植物病原菌具有拮抗效果，体现出很强的生防潜力。

隶属Bcc的NSM-05可能具有条件致病性，因此必须对其进行生物安全性检测。

2. 国内外研究现状分析

洋葱伯克霍尔德氏菌(burkholderia cepacia)是一组基因型不同表现型相近的复合物(burkholderia cepacia complex)简称bcc，现已发现的bcc有10个基因型，bcc的某些基因型能引起洋葱伯克氏菌综合症。

在国内外已有不少死亡病例，已引起不少国家的高度重视，并停止或禁止一些bc菌株在农业上的使用。

2004年郑维等从堆肥样本中分离的bcc菌株cf-66对立枯丝核菌，尖镰孢以及白假丝酵母等表现出了很强的抗菌活性，并鉴定该菌为bc菌基因型v。

3. 研究的基本内容与计划

我们在做洋葱伯克霍尔德氏菌安全性检测时分为传统方法和分子方法，传统方法是将洋葱伯克霍尔德氏菌接种到洋葱鳞茎，苜蓿，和烟草上观察其接种结果。

运用bcesm和cbla毒力基因的特异性引物，以提取的nsm-05的dna为模板进行pcr为扩增。

pcr产物经过琼脂糖凝胶电泳来检测其是否存在bcesm和cbla毒力基因。

4. 研究创新点

在此次对新洋葱伯克霍尔德氏菌NSM-05的生物安全性检测中，我们不仅运用了传统的动物模型（苜蓿模型）、植物模型（烟草模型）来检测其生物安全性，还运用了分子检测方法，即特异引物的PCR扩增来检测其是否具有致病基因BCESM、clbA，传统方法与分子方法的结合更具有说服力，为新洋葱伯克霍尔德氏菌NSM-05在农林业上的安全应用提供了强有力的依据。