簸箕柳AFLP引物多态性比较开题报告

1. 研究目的与意义

研究目的：　　　aflp (amplified fragment length polymorphism，扩增片段长度多态性) 是由vos等发展起来的一种新的高效分子标记技术。

其被广泛应用于植物种质资源遗传多样性和系统进化研究、遗传连锁图谱构建、基因定位、分子标记辅助育种、芽变鉴定等研究。

aflp较强的多态分辨能力是通过改变限制性内切酶种类，选择性碱基的种类、数目以及引物组合实现的,不同的物种在同一aflp引物下的多态性不同，因此针对不同的植物都需要对aflp引物进行多态性筛选，由于目前对簸箕柳的研究较少，本研究拟通过改变选择性碱基的种类及引物组合在簸箕柳中进行多态性分析，建立一套适合于簸箕柳aflp标记分析的高多态性引物及引物组合。

2. 国内外研究现状分析

aflp技术结合了rapd和rflp的特点，既具有pcr的高效性、安全性和方便性的特点，又具有rflp可靠性好、重复性高的优点，它是一种半随机扩增，aflp能产生更多的多态性，比rflp、ssr、arpd多10-100倍，使得它被广泛应用于动植物的遗传多样性研究、遗传图谱构建、种质鉴定、基因定位和基因的克隆和序列分析等各个方面。

目前，aflp技术在水稻、玉米、小麦、大豆、棉花等主要农作物，苹果、桃、葡萄等果树，番茄、莴苣、辣椒、甘蓝等17种蔬菜，鸢尾、玉兰、梅等观赏植物，猪、鸡、小鼠等动物中均应用广泛，得到了令人满意的结果。

　　　柳树栽培历史悠久，在编筐、栅栏、防护架、医药、园林绿化和生物滤池等方面都有非常广泛的应用。

3. 研究的基本内容与计划

具体实验内容如下：1.设计aflp引物：通过改变选择性碱基的种类、数目来变换aflp引物的种类； 2. dna提取：选择一个簸箕柳杂交群体，提取亲本及6个子代的叶片组织dna；3. aflp引物多态性检测：aflp引物在2个亲本、6个子代的dna中进行pcr扩增，利用abi3730对pcr产物进行测序，并用genemapper 3.7对结果进行统计。

计划：2013.12-2014.1 搜集并查阅国内外与aflp在其它特种中的多态性及其在簸箕柳中的应用等相关文献，总结出别人在这方面的研究手段和方法，写出文献综述和开题报告。

2014.2-3准备所需实验材料，进行实验室测定与分析，数据处理与分析工作。

4. 研究创新点

本研究拟通过改变选择性碱基的种类及引物组合在簸箕柳中进行多态性分析，建立一套适合于簸箕柳AFLP标记分析的高多态性引物，为AFLP在簸箕柳上的应用打下基础。