1. 研究目的与意义
染色体是遗传物质的载体,染色体形态及其倍性水平的研究是开展植物遗传育种工作的前提和基础。
有效的倍性鉴定是了解其遗传背景,种质资源保存和进一步应用的基础,是生产、研究的重要依据和前提条件。
木兰科植物具有极高的科研价值及开发利用价值,又具有芳香,药用,木材等多种经济效益和绿化、美化,优化环境等生态效益,是一类具有很高观赏价值的园林绿化树种。
2. 国内外研究现状分析
1983年,galbraith运用流式细胞术(flow cytometry,fcm)第一次成功测定了17种植物的核dna含量,开创了fcm检测植物核dna含量与倍性水平的先河。
20世纪90年代国内开始有学者将流式细胞术(flow cytometry,fcm)运用到植物倍性分析中。
近年来发现利用植物根尖分裂组织或老者幼嫩叶片较易获得合适的单细胞悬液,使得fcm在植物学研究方面得到了广泛应用,尤其是倍性分析和染色体结构分析等领域。
3. 研究的基本内容与计划
前期准备:①查阅文献、提炼与论文有关的内容②学会流式细胞仪的操作及样品前处理材料和方法:材料:木兰科植物幼叶试剂:三种解离液、pi染液仪器:bd流式细胞仪流式细胞术测木兰科植物c值及倍性的主要流程:①取约1 g 实验材料放入预冷的培养皿里,加入预冷的解离液1-2ml,锋利刀片一次性快速切碎,整个过程,材料须浸没在解离液里。
②吸取培养皿内的解离液,用400目的滤膜过滤后,置于4度冰箱中,孵育5min(这步可以不用)。
③1000rpm,4度,离心5min④弃上清后,再加入100ul 预冷的解离液(这步可以不用),同时加入200 ul rna酶 800ul 预冷的染料(配方见pi染液配方),共约250ul,4度冰箱避光染色10min-2小时。
4. 研究创新点
木兰科植物花色艳丽,花香宜人,树姿优美多态,树叶、聚合果亦各具特色,是一类具很高观赏价值的园林、庭园绿化树种。
通过流式细胞术,可以快速而精确地测定木兰科植物c值及倍性,根据近缘物种的c值极为相似,通过c值获取基因组大小这一特征信息,可用于分析物种之间的亲缘关系,同时也可用来鉴定杂交物种,为园林上进行木兰科新品种的培育与引种驯化提供了依据。
其次,通过进行木兰科植物构筑型的研究,了解其生长特性,为园林造型提供参考。
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