芽孢杆菌sRNA Bas32 突变菌株的构建及功能研究开题报告

1. 研究目的与意义

解淀粉芽孢杆菌（bacillus amyloliquefaciens）fzb42是一株背景研究较为深入的革兰氏阳性pgpr，我们在对fzb42的前期研究中，发现了一个新的非编码型具有基因调节功能的srna bas32。

已知srna对细菌的基因表达具有重要作用，但是目前bas32的功能尚不清楚。

对bas32进行敲除研究，进而研究其表型功能，具有重要意义。

2. 国内外研究现状分析

国内外研究表明，sRNA 对细菌的生长、繁殖具有重要的调节作用，它们的主要功能是感应环境的变化，调控细胞的代谢途经、生长方式使之与环境相适应，以及控制细菌毒力基因的表达；利用重叠延伸PCR技术进行基因工程的相关操作也比较成熟；对Biolog微生物自动分析系统的使用也不局限于对菌株的鉴定，逐渐利用其结果进行相关深入的分析和研究。

3. 研究的基本内容与计划

（1）2016.2.22―2016.2.29：阅读文献。熟悉掌握以下概念，基本操作流程，和研究意义：解淀粉芽孢杆菌，细菌的转化，非编码srna，pcr

（2）2016.3.1―2016.5.15：实验构建解淀粉芽孢杆菌fzb42的srna bas32的缺失突变株。

（3）2016.5.16―2016.5.31：整理试验数据，撰写毕业论文，准备答辩。

4. 研究创新点

运用重叠延伸PCR（overlapextensionPCRorOE-PCR）技术，对sRNA上未知功能的基因进行敲除，从而构建突变菌株。

完成之后利用Biolog微生物自动分析系统对其利用碳源以及化学敏感物质的情况进行分析研究，从而通过其表型研究其功能。